c3a細胞，肝癌細胞

注意事項如下:

一 、收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

二、對于貼壁細胞，若細胞漂浮:培養瓶不開封，用75%酒精擦拭后平躺置于培養箱內。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉;如細胞還不貼壁，將細胞離心收集移到新的培養瓶中，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

三、建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和本公司技術部溝通交流。

我們全心全意為您服務，提供優質產品，保障售后服務，真心把客戶奉為上帝，及時處理客戶訂單，全程跟蹤貨源，采用誠信快遞運輸，認真解答客戶疑問，對客戶售后問題，不拖沓，不推卸責任，認真負責的態度。

停滯期(Stagnate Phase):細胞數量達飽和密度后，細胞遂停止增殖，進入停滯期。此時細胞數量不再增加，故也稱平頂期(Plateau)。停滯期細胞雖不增殖，但仍有代謝活動，繼而培養液中營養漸趨耗盡，代謝產物積累、pH降低。此時需做分離培養即傳代，否則細胞會中毒，發生形態改變，重則從底物脫落死亡，故傳代應越早越好。傳代過晚(已有中毒跡象)能影響下一代細胞的機能狀態。在這種情況下，雖進行了傳代，因細胞已受損，需要恢復，至少還要再傳1~2兩代，通過換液淘汰掉死細胞和使受損輕微的細胞得以恢復后，才能再用。結果反而耽誤了時間，這是在實驗中應特別注意的。

四、原代培養:即*次培養，是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養，中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義:

培養物一經接種到培養器皿(瓶)中就不在分割，任其生長繁殖;

原代培養中的“代”并非細胞的“代”數，因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞;

原代培養過程中不分割培養物不等于不更換培養液，也不等于不更換培養器皿。

正常細胞培養的世代數有限，只有癌細胞和發生轉化的細胞才能無限生長下去。所謂轉化即是指正常細胞在某種因子的作用下發生突變而具有癌性的細胞。目前世界上許多實驗室所廣泛傳用的HeLa細胞系就是1951年從一位名叫Henrietta Lacks的婦女身上取下的宮頸癌細胞培養而成。此細胞系一直延用至今。

原代培養的細胞一般傳至10代左右就不易傳下去了，細胞的生長就會出現停滯，大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去，這些存活的細胞一般能夠傳到40~50代，這種傳代細胞叫做細胞株。細胞株的遺傳物質沒有發生改變,在培養過程中其特征始終保持。當細胞株傳至50代以后又會出現“危機”，不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質發生了改變，并且帶有癌變的特點，有可能在培養條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱為細胞系。

c3a細胞，肝癌細胞

T-47D細胞，人乳腺管癌細胞

CCD-1095Sk細胞，人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞

SK-BR-3*細胞，人乳腺腺癌細胞

SW 1353細胞，人軟骨肉瘤細胞

GNM 細胞，人上頜牙齦癌頸淋巴結轉移癌細胞

T6細胞，人舌癌細胞

 TSCCA細胞，人舌鱗癌細胞

CAL 27細胞，人舌鱗癌細胞

Tca-8113細胞，人舌鱗癌細胞

TSCCa細胞，人舌鱗癌細胞

CRT 細胞，人神經膠質瘤細胞

U251細胞，人神經膠質瘤細胞

SH-SY5Y細胞，人神經瘤細胞

BE(2)-M17細胞，人神經母瘤細胞

CRL-2268細胞，人神經母瘤細胞

IMR-32細胞，人神經母瘤細胞

SH-5Y5Y細胞，人神經母瘤細胞

SK-N-AS細胞，人神經母瘤細胞

SK-N-BE(2)細胞，人神經母瘤細胞

SK-N-MC細胞，人神經上皮瘤細胞

A-498細胞，人腎癌細胞

A498-EGFP-puro細胞，人腎癌細胞

ACHN細胞，人腎癌細胞

KC細胞，人腎癌細胞

OS-RC-2細胞，人腎癌細胞

G-401細胞，人腎癌Wilms細胞

SK-NEP-1細胞，人腎母瘤細胞

SW-13細胞，人腎上腺皮質癌細胞

NCI-H295R細胞，人腎上腺皮質腺癌細胞

KP-N-NS細胞，人腎上腺神經母瘤(腦轉移)細胞

NCI-H205細胞，人腎上腺腺瘤細胞

786-O(786-0)細胞，人腎透明癌細胞

CaKi-1細胞，人腎透明癌細胞

CaKi-2細胞，人腎透明癌細胞

786-0細胞，人腎透明腺癌細胞

ACHN細胞，人腎透明腺癌細胞

769-P細胞，人腎腺癌細胞

HuTu-80細胞，人十二脂腸腺癌細胞

CaES-17細胞，人食管癌細胞

EC9706細胞，人食管癌細胞

Eca-109細胞，人食管癌細胞

KYSE150細胞，人食管癌細胞

TE-1細胞，人食管癌細胞

原代培養是建立各種細胞系(株)必經的階段，其是否成功與組織污染與否、供體年齡、培養技術和方法、適宜培養基的選擇等多種因素有關。由于原代培養的細胞轉化性極小，對病毒敏感性好，因此適應制備疫苗等生物制品;但也存在有潛在外源因子、不能事先檢查標本、且受供體年齡健康狀況的影響而導致批間差異大等缺陷。目前常用的原代細胞培養有雞胚成纖維細胞及豬腎、猴腎、地鼠腎等原代細胞。

原代培養的基本過程包括取材、培養材料的制備、接種、加培養液、置培養條件下培養等步驟，在所有的操作過程中，都必須保持培養物及生長環境的無菌。

多數情況下，分散的細胞若屬于貼壁依賴型細胞，就能黏附、鋪展于培養器皿和載體表面生長而形成細胞單層，這種培養方式稱為單層細胞培養(monolayer culture)，又叫貼壁培養(adherent culture)。少數情況下，培養的細胞沒有貼壁依賴性，可通過專門設備使細胞始終處于懸狀態而在體外生長，這種形式稱為懸浮培養(suspension culture)。如何讓接種的細胞盡快貼壁，是決定培養成功的關鍵步驟:

取決于適當的生長基質表面;

可降低接種后培養液對細胞的浮力，如先少補加少量培養液，待細胞貼壁后再補足營養液繼續培養;

注意適當的細胞接種密度，一般10⁵個/ml左右。

五、傳代培養:當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。此時就需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿(瓶)內，再進行培養。這個過程就稱為傳代(passage)或者再培養(subculture)。對單層培養而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。

體外培養技術中所謂的傳“代”概念并不等于細胞生物學中“親代細胞”與“子代細胞”中“代”的概念。傳代培養的實質就是分割后再一次培養，可以相對地衡量培養物的培養年齡。

六、生長曲線:細胞接種入培養瓶后，先進入2-24h的延遲期(lag period)，然后進入指數生長期(即對數期)(log phase)，匯合成單層進入緩慢生長或停滯期(即平臺期)(plateau lhase)。每種細胞系(cell line)的這些生長期(growth phase)都是特征性的，只要環境條件保持恒定，每一次測定結果應該是可重復的。