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細胞培養的基本原理與技術 現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術,而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系,特別是在醫藥領域的發展,細胞培養更具有特殊的作用和價值。
杭州仟諾生物科技有限公司 |
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更新時間:2024/07/29 20:30:20瀏覽次數:743
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HPB-ALL人T細胞白血病細胞
【背景資料】 見細胞說明書
【產品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系
公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養PBS量是10%,如果出現細胞狀態不良情況,可以提高PBS量到15%,待細胞穩定后,調回PBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養,都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。復蘇細胞注意事項:
1收到細胞后當天換液,全部更換成客戶自己的新鮮培養基,放進培養箱,第二天再消化。
2邊觀察邊消化,根據細胞的形態,終止消化時間,采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣,如可吹打下來,即終止消化。客戶摸索比較好的消化時間。
3隨細胞有一份細胞操作說明書,請客戶仔細查看。
4記得加1%雙抗,降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,以備后用。
5售后時間為一周,僅限于細胞本身的質量問題,而因乙方自己不當操作(不規范操作,消化過度,不加雙抗導致的污染等)導致的細胞問題不在售后范疇。
6收到細胞后,如細胞狀態不佳,或培養中遇到問題,煩請當天盡快聯系,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據,請您務必重視。
7剛收到細胞時,胎牛血清可以用15%培養兩三天,利于細胞盡快恢復狀態,細胞狀態穩定后,再調回10%即可。
HPB-ALL人T細胞白血病細胞
細胞培養三不要:
養科研細胞是生物醫學研究的基本功。有三個小經驗可以和大家分享一下:
1. 不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養基怎么越用越發紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發現培養液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內的溫度高)
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發現根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來就不燒瓶口。來美國以后發現這里更*,超凈臺內根本就不點酒精燈。
2. 不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養細胞就像養孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養不好,就越是經常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環境。你跑去看細胞,培養瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經常可以看到新手一天到晚都在看細胞,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長。
3. 不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我師兄在做血管平滑肌原代的時候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。,公司專業提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系(三千多種),提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態、培養條件、應用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息,我們擁有豐富的細胞系培養經驗,能提供細胞培養*的技術支持,讓您實驗再無煩擾!
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