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細胞培養的基本原理與技術 現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術,而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系,特別是在醫藥領域的發展,細胞培養更具有特殊的作用和價值。
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更新時間:2024/07/30 20:24:12瀏覽次數:542
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注意事項如下:
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2 對于貼壁細胞,若細胞漂浮:培養瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養箱內。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉;如細胞還不貼壁,將細胞離心收集移到新的培養瓶中,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。
3 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和本公司技術部溝通交流。
我們全心全意為您服務,提供優質產品,保障售后服務,真心把客戶奉為上帝,及時處理客戶訂單,全程跟蹤貨源,采用誠信快遞運輸,認真解答客戶疑問,對客戶售后問題,不拖沓,不推卸責任,認真負責的態度。
停滯期(Stagnate Phase):細胞數量達飽和密度后,細胞遂停止增殖,進入停滯期。此時細胞數量不再增加,故也稱平頂期(Plateau)。停滯期細胞雖不增殖,但仍有代謝活動,繼而培養液中營養漸趨耗盡,代謝產物積累、pH降低。此時需做分離培養即傳代,否則細胞會中毒,發生形態改變,重則從底物脫落死亡,故傳代應越早越好。傳代過晚(已有中毒跡象)能影響下一代細胞的機能狀態。在這種情況下,雖進行了傳代,因細胞已受損,需要恢復,至少還要再傳1~2兩代,通過換液淘汰掉死細胞和使受損輕微的細胞得以恢復后,才能再用。結果反而耽誤了時間,這是在實驗中應特別注意的。
四、原代培養:即*次培養,是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養,中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義:
培養物一經接種到培養器皿(瓶)中就不在分割,任其生長繁殖;
原代培養中的“代”并非細胞的“代”數,因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞;
原代培養過程中不分割培養物不等于不更換培養液,也不等于不更換培養器皿。
正常細胞培養的世代數有限,只有癌細胞和發生轉化的細胞才能無限生長下去。所謂轉化即是指正常細胞在某種因子的作用下發生突變而具有癌性的細胞。目前世界上許多實驗室所廣泛傳用的HeLa細胞系就是1951年從一位名叫Henrietta Lacks的婦女身上取下的宮頸癌細胞培養而成。此細胞系一直延用至今。
原代培養的細胞一般傳至10代左右就不易傳下去了,細胞的生長就會出現停滯,大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去,這些存活的細胞一般能夠傳到40~50代,這種傳代細胞叫做細胞株。細胞株的遺傳物質沒有發生改變,在培養過程中其特征始終保持。當細胞株傳至50代以后又會出現“危機”,不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質發生了改變,并且帶有癌變的特點,有可能在培養條件下無限制地傳代下去,這種傳代細胞稱為細胞系。
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