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RNAi技術

對于基因調控和功能研究，abm提供了多種表達系統，用于：

 

siRNA：有效表達任何靶siRNA來敲除任何基因，而無需設計發夾環shRNA結構，可在慢病毒，AAV和腺病毒中使用。

miRNA：使用我們現成的病毒載體和包裝好的病毒以及我們的檢測和定量工具，抑制或過表達任何miRNA，以研究哺乳動物系統中的轉錄后基因調控。

UTR Reporters：使用我們的3'UTR或5'UTR平臺定量研究特定miRNA對靶基因的調控，這些平??臺均可作為針對任何人類，小鼠或大鼠基因的預制慢病毒載體和慢病毒的庫提供。

 

慢病毒siRNA文庫

來自abm的iLenti™RNAi表達系統允許通過轉染或慢病毒感染靶細胞來有效表達任何siRNA。該系統基于*的收斂啟動子設計，可實現更高的靶基因敲除效率，而無需單個啟動子載體中通常使用的發夾環結構。abm提供了人類，小鼠和大鼠siRNA的全面文庫，可提供載體或預包裝的慢病毒格式

 

 

iLenti™siRNA的優點：

 

慢病毒載體中的siRNA，用于轉染或病毒感染。

非常穩定和高產的質粒；不需要特殊的感受態細胞。

使用比傳統的19或21 bp寡核苷酸更有效的27-29 bp寡核苷酸。

聚合啟動子可避免發夾環結構，使測序和質粒生長更加容易。

GFP報告基因，用于監測轉染或病毒感染。

所有構建體均可以載體或病毒形式獲得，包括用于改善基因敲除的合并病毒。

 

siRNA集是否由帶有shRNA或siRNA的慢病毒載體組成？您是否驗證RNA干擾？

我們的RNA干擾慢病毒載體包含siRNA。我們采用雙收斂啟動子系統，其中siRNA的有義和反義鏈由兩個不同的啟動子表達，而不是在發夾環中表達-以避免可能發生的任何重組事件。

 

如果您感興趣的基因沒有經過驗證和發布的siRNA序列，我們將使用siRNA設計軟件來定位合適的靶位點。如果這些設計的siRNA在您的實驗中不能有效地降低基因表達，我們將提供一次替代（免費），其中將包含一組新的序列供您嘗試。

 

Abm保證一組購買的四個siRNA Lentivector構建物中少有一個在合適的靶細胞中具有超過70％的擊倒效率，顯示出> 80％的轉染效率。如果仍然認為這四個構建體無效，那么該基因很可能對siRNA敲低不敏感。

 

慢病毒miRNA表達

miRNA模擬物用于功能評估，并用作功能獲得研究的有用的外源工具。abm的表達miRNA的慢病毒可讓您的細胞系穩定，長期表達miRNA。

 

為了滿足您的所有需求，我們提供同時表達初級miRNA和成熟miRNA的miRNA慢病毒。初級miRNA的表達意味著將表達miRNA周圍的整個區域，并且前體的兩個臂都將被加工，就像它是內源的一樣。我們成熟的miRNA表達載體是專為高水平表達和加工成熟miRNA而設計的。

 

 

主要特征

 

我們提供了來自人類，小鼠和大鼠的6500多個成熟和主要miRNA的集合。

慢病毒遞送，用于將遺傳物質整合到宿主細胞中，引起穩定的長期基因表達。

慢病毒具有廣泛的宿主范圍，可以感染分裂細胞和非分裂細胞，從而可以將基因傳遞給多種細胞類型。

 

產品信息

miRNA結合

工作流程

我們提供合成，載體或病毒形式的miRNA過表達/模擬產物和miRNA抑制劑，以適合您的實驗。

pLenti-III-mir-GFP，pLenti-III-mir，pLenti-III-mico-GFP，pLenti-III-mico矢量圖

載體圖

我們的miRNA過表達產品可提供或不提供GFP，并可提供過早的miRNA插入片段或成熟的5p和3p miRNA插入片段。

 

什么是Sanger miRBase序列數據庫？

miRBase是由Sanger研究所建立的序列數據庫。microRNA Registry中的每個條目均代表microRNA轉錄本的預測發夾部分（在數據庫中稱為mir），其中包含有關成熟microRNA序列（稱為miR）的位置和序列的信息。該數據庫在結果發布之前為microRNA基因獵人提供了新穎的microRNA基因的唯yi名稱，并為已發布的microRNA提供了可搜索的數據庫。

 

       pLenti-III-miR-Off系統或LentimiRa系統使用空白載體進行對照，但我通常使用加擾對照進行si-RNA實驗。是否支持使用未加擾的miRNA實驗空白對照？

加擾和空白對照都是有效的陰性對照。但是，在使用加擾序列時，脫靶效應存在爭議。通過使用空白載體作為陰性對照，可以消除脫靶效應。如果您的實驗需要對空白控件進行加擾的控件，我們也可以根據要求為您定制。

pre-miRNA和GFP是否都在同一CMV啟動子下？如果是，那么兩者之間是否存在翻譯切割位點？

是的，pre-miRNA和GFP都在同一CMV啟動子下。

 

兩者之間沒有翻譯切割位點。

 

轉錄終止位點在pre-miRNA之后，因此GFP和pre-miRNA一起轉錄，因此使GFP成為miRNA的實際轉錄報告基因。mRNA的pre-miRNA區域自身折疊并形成莖環結構，該莖環結構將在細胞中被Drosha / Pasha酶處理，并從mRNA的GFP部分切割下來。

 

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