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詳細介紹
產品貨號 | 產品名稱 | 品牌 |
UM-0604-0050 | Anti - K63 TUBEs, K63 TUBEs, Flag | lifesensors |
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UM604：K63管（標志）
SKU：UM-0604-0050
類別：抗K63管，K63管
標簽：綁定實體，特定于鏈接，下拉
技術指標 附加信息 評論（0） 應用領域 文件資料
技術指標
FLAG®K63 TUBE是從細胞和組織提取物或體外合成混合物中有效分離和富集K63多泛素化蛋白的理想試劑。FLAG®K63 TUBE由多個泛素相互作用基序（UIM）組成，這些基序由剛性的螺旋接頭連接，這些接頭將UIM隔開以選擇性地結合擴展的K63連接的多泛素鏈。結果是顯示出與K63連接的多泛素具有高親和力結合的肽，并且相對于K48-和K11-連接具有100010,000倍的選擇性。該肽在體內的表達抑制了K63連接的多聚泛素依賴性過程，并保護K63連接的多聚泛素鏈免于降解。將該肽與FLAG表位標簽結合起來，產生了適合分離的強力親和試劑，K63連接的多聚泛素修飾的蛋白的純化和表征。標記K63-TUBE允許分離K63連接的多聚泛素，而無需過度表達泛素突變體，標記的泛素或包含DUB抑制劑，而這些都可以改變細胞生理學。分離的泛素化蛋白可以通過蛋白質印跡，質譜或進一步的生化分析來表征。（FLAG是Sigma-Aldrich Corporation LLC的注冊商標）。
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信息
標簽
旗
分子量
9 kDa
物理狀態
液體
數量
50微克
濃度
變量
存儲
-80°C，避免凍融
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應用領域：
從細胞和組織提取物中分離和富集K63多泛素化蛋白
泛素化蛋白的分離，用于蛋白質組學研究
好處
K63鏈的納摩爾離解常數（Kd）
K63鏈比K48鏈或K11鏈優100010,000倍
不需要將抗原決定簇標記的泛素過表達用于下拉
與FLAG兼容® 技術，提供了靈活性和特異性
背景
泛素和多泛素化 泛素（Ub）對蛋白質的翻譯后修飾對其區域化有著深遠的影響， 退化和功能（1）。單泛素與靶蛋白的結合稱為單泛素化， 附加的Ub部分可與該初始Ub共軛，形成聚合物鏈。存在功能性多ub鏈的證據 通過Ub中的七個賴氨酸殘基中的任何一個，甚在Ub的N-末端形成。多泛素化是可逆的，與 復合“連接酶”催化鏈的連接，以及 二氫奎寧酶（DUBs）。兩種具特征的多泛素化形式通過賴氨酸48（K48）或 63（K63）。K48連鎖多泛素化普遍的結果是蛋白酶體介導的降解，而 在其他細胞過程中，K63連接的多泛素化修飾參與了DNA的調節 損傷反應（2），內質體分類（3，4），錯誤折疊/聚集蛋白的自噬（5，6）和神經退行性變（7）。 傳統的泛素化蛋白的鑒定方法通常需要抗原表位標記的Ub的免疫沉淀 通過蛋白質的過度表達。基于它們對泛素的天然親和力，特定的泛素結合相關結構域 （UBAs）已經成為從細胞環境中分離和檢測多泛素鏈的有用試劑。這些 然而，蛋白質對泛素的親和力相對較低。由于這些原因，決定了 蛋白質很難被證明。 試管：多泛素分離與表征的一次革命 由CIC bioGUNE的Manuel Rodriquez博士開發的串聯泛素結合實體（管）的使用克服了這些問題 問題，并正在成為泛素研究*的策略（8，9）。第yi代的管子 K48-和K63連接的具有一個數字納米摩爾Kd的四ub鏈，比單體Ubs緊密約100到1000倍。 試管也能保護蛋白質免受dub和蛋白酶體的侵害，即使沒有通常需要的抑制劑來阻止這種情況的發生 活動。這可以有效地從細胞系、組織和器官中分離天然多聚體鏈和附著蛋白 比上述條件更不可能改變細胞生理的條件。TUBE1和TUBE2近 證明可在不加區別的情況下豐富所有多亞基鏈連接類型，使這些試劑適用，即使 相關蛋白的連鎖類型未知（8）。
下一代管子：聚支鏈的連鎖特異性隔離 近，西姆斯等人。（10） 已經證明串聯泛素相互作用基序（UIMs）可以被設計成顯示出顯著的 對聚ub鏈結合專一性的偏好。這些結構與低納米摩爾Kd結合K63 Ub鏈，但結合不良 K48和K11鏈條。K63 polyUb的1000到10000倍偏好是UIM和長度以及 串聯uim之間連接器的螺旋性質。這個鏈接器賦予uim剛性和空間，以便與 每一個Ub分子，增強對延伸K63鏈的識別。此外，這些串聯uim的表達似乎 選擇性地抑制K63依賴的細胞過程，并保護聚ub鏈不被原位降解。這些K63管子 作為研究細胞過程特別依賴于K63的工具，生命傳感器得到了進一步的發展 多泛素化。Flag K63-TUBE 1允許從細胞和組織中捕獲和分離由這種連鎖類型修飾的蛋白質 提取物或體外混合物
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