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Camtag- AT0011  Camtag各系列產(chǎn)品  Camtag各系列產(chǎn)品

抗 β-微管蛋白兔單克隆抗體加載控制目錄編號(hào): AT0011微管蛋白是微管的主要成分。它結(jié)合了兩摩爾的 GTP，一個(gè)在 β 鏈上的可交換位點(diǎn)，一個(gè)在 α 鏈上的不可交換位點(diǎn)。

容量: 100ul濃度: 1毫克/毫升可用性: 庫存1,438.20

抗 β-微管蛋白兔單克隆抗體反應(yīng)性小鼠，大鼠，人體試驗(yàn)應(yīng)用概述 WB: 1/1000-1/10000。尚未在其他應(yīng)用程序中測(cè)試。最佳稀釋度/濃度應(yīng)由最終用戶確定。產(chǎn)品圖片/抗 β 微管蛋白兔單克隆抗體負(fù)載控制特性與 KLH 結(jié)合的免疫原合成肽來源于人 β 微管蛋白的1-100個(gè)殘基。克隆性單克隆，克隆號(hào): 4D6同種型兔 IgGForm 液體防腐劑: 非成分: 50% 甘油，PBS，pH7.4在 -20 °C 下儲(chǔ)存。避免凍融循環(huán)。所有泳道: 抗 β-微管蛋白抗體-1/5000稀釋的負(fù)載控制泳道1: HeLa (人上皮癌細(xì)胞系)全細(xì)胞裂解物泳道2: A431(人上皮癌細(xì)胞系)全細(xì)胞裂解物/蛋白質(zhì)30μg/泳道。使用 ECL 技術(shù)開發(fā)在還原條件下進(jìn)行。預(yù)測(cè)波段大小: 50千達(dá)觀測(cè)波段大小: 50千達(dá)

抗 COX IV 小鼠 mAb-線粒體加載控制目錄編號(hào): AT1579這種蛋白質(zhì)是胞色素C氧化酶的核編碼多肽鏈之一，是線粒體電子傳輸中的末端氧化酶。可用性: 庫存: 1,998.402,498.001人民幣1,998.40添加到 cartOverviewDescriptionanti-COX IV 小鼠單克隆抗體-線粒體標(biāo)記/反應(yīng)性小鼠，人，鼠測(cè)試應(yīng)用程序: 1/500-1/1000。檢測(cè)大約20kDa 的波段(預(yù)測(cè)分子量: 20kDa)。性質(zhì)免疫原合成肽來源于人 COXIV 克隆小鼠單克隆小鼠 IgG1形式液體防腐劑: 0.02% 氮化鈉2 + 和 Ca2 +) ，150mM 氯化鈉，pH7.4儲(chǔ)存指導(dǎo)儲(chǔ)存在 -20 °C 或更低。避免反復(fù)冷凍和解凍。應(yīng)用 WB 圖像 Western Blot: COX IV 小鼠單克隆抗體(AT1579)巷1: 標(biāo)記，巷2: 人類細(xì)胞系 HeLaLane，3: 人類細(xì)胞系 HEK293，巷4: 人類細(xì)胞系 A-431，巷5: 人類細(xì)胞系 HepG2

抗環(huán)氧化酶 IV 兔單克隆抗體線粒體負(fù)荷控制目錄編號(hào): AT0020這種蛋白質(zhì)是線粒體電子傳輸中的末端氧化酶——胞色素c氧化酶的核編碼多肽鏈之一。容量: 100ul? 1毫克/毫升可用性: 1,998.402,498.001人民幣1,998.40加入 cartOverviewDescriptionanti-COX IV 兔子單克隆抗體-mtml 加量控制反應(yīng)性小鼠，大鼠，人類測(cè)試應(yīng)用/WB (1:500-1:4000)最佳稀釋度/濃度應(yīng)該由最終用戶決定。對(duì)應(yīng)于人 COX IV (UniProt ID: P13073)氨基酸1-169區(qū)域的免疫原重組片段。克隆性兔單克隆，克隆號(hào): 4H6同種型兔 IgGFormQuiidpH: 7.00防腐劑: 0.01% 硫柳汞(巰基)成分: 0.75% 氨酸，1.21% Tris，20% 甘油儲(chǔ)存指導(dǎo)儲(chǔ)存在 -20 °C 或更低。避免反復(fù)冷凍和解凍。應(yīng)用/WB 圖像蛋白質(zhì)印跡-抗環(huán)氧化酶 IV 兔單克隆抗體(AT0020)1/1000稀釋的抗環(huán)氧化酶 IV 抗體 + 40μg 的 HepG2全細(xì)胞裂解物預(yù)測(cè)帶寬: 17kDa

抗 GAPDH 小鼠單克隆抗體加載 ControlCatalog 編號(hào): AT0002

甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）在糖酵解過程中催化甘油醛-3-3-磷酸酯的磷酸化。盡管GAPDH在組織間有差異表達(dá)，但被認(rèn)為是一種組成性表達(dá)的看家蛋白。由于這個(gè)原因，GAPDH mRNA和蛋白水平通常作為對(duì)照在實(shí)驗(yàn)中測(cè)量，以量化其他靶點(diǎn)表達(dá)的特定變化。最近的工作闡明了GAPDH在細(xì)胞凋亡、基因表達(dá)和核轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用。GAPDH也可能在神經(jīng)退行性病變?nèi)绾嗤㈩D病和阿爾茨海默病中發(fā)揮作用。GAPDH是由四個(gè)30-40kDa亞基組成的146kDa四聚體。該抗體識(shí)別單體（36kDa）。

小鼠單克隆抗體到 GAPDH 加載控制反應(yīng)性人類，小鼠，老鼠測(cè)試的應(yīng)用程序/WB: 1/2000-1/10000。預(yù)測(cè)分子量: 36kDa。尚未在其他應(yīng)用程序中測(cè)試。最佳稀釋度/濃度應(yīng)由最終用戶確定。產(chǎn)品圖片

特異性

該抗體檢測(cè)內(nèi)源性GAPDH水平。

屬性

免疫原

對(duì)應(yīng)于人GAPDH羧基末端附近殘基的合成肽

克隆性

單克隆，克隆號(hào)：3G7

同位素

小鼠IgG1

類型

液體，100μg，1mg/mL

小鼠單克隆免疫球蛋白，磷酸鹽緩沖鹽水（PBS），pH 7.3（+/-0.1），50%甘油，0.1mg/mL BSA（IgG，無蛋白酶）作為穩(wěn)定劑，0.02%氮化鈉作為防腐劑。

儲(chǔ)說明

短期儲(chǔ)存在+4°C（1-2周）。等分并儲(chǔ)存在-20°C下，避免冷凍/解凍循環(huán)。

數(shù)據(jù)庫鏈接

SwissProt:P04406人類

SwissProt:P16858鼠標(biāo)

SwissProt:P04797大鼠

應(yīng)用

WB圖像

Western Blot：GAPDH抗體-以1:10000的稀釋度使用GAPDH抗原對(duì)小鼠細(xì)胞系（A）NIH 3T3（B）RAW 264.7的裂解液中的GAPDH蛋白進(jìn)行WB檢測(cè)。

 蛋白質(zhì)印跡程序1。在0.5毫升冰冷的細(xì)胞裂解緩沖液中裂解大約107個(gè)細(xì)胞(配方如下)。該緩沖液是一種修飾的 RIPA 緩沖液，適用于回收大多數(shù)蛋白質(zhì)，包括膜受體、細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白和可溶性蛋白。這種細(xì)胞裂解緩沖制劑可作為一個(gè)單獨(dú)的產(chǎn)品，需要補(bǔ)充蛋白酶抑制劑立即使用前(貓。# FNN0011，溫度計(jì))。其他細(xì)胞裂解緩沖液制劑，如 Laemmli 樣品緩沖液和 Triton-X 100緩沖液，也與本程序兼容。對(duì)于每個(gè)特定的應(yīng)用，可能需要對(duì)細(xì)胞刺激方案和細(xì)胞裂解過程進(jìn)行額外的優(yōu)化。2.將裂解物以14,000 x g 離心10分鐘，清除細(xì)胞碎片。或者，裂解物可以在100,000 x g 下超離心30分鐘以獲得更大的澄清。3.小心地將澄清的細(xì)胞裂解物倒入干凈的試管中，并用合適的方法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度，如布拉德福德試驗(yàn)。建議使用聚丙烯管儲(chǔ)存細(xì)胞裂解物。4.用等體積的2xLaemmli 樣品緩沖液(125mM Tris，pH6.8,10% 甘油，10% sDS，0.006% 溴酚藍(lán)和130mM 二硫蘇糖醇[ dTT ])反應(yīng)裂解物的等分試樣，并在100 °C 下將混合物煮沸90秒。5.將10 ~ 30μg 的細(xì)胞裂解物加入適當(dāng)?shù)膯我话俜直然蛱荻任⒛z孔中，用 SDS-PAGE 電泳分離蛋白質(zhì)。6.在準(zhǔn)備西藥轉(zhuǎn)移時(shí)，切一塊比凝膠稍大的 PVDF。膜在甲醇中浸泡1分鐘，然后用 DDH2O 沖洗5分鐘。或者，可以使用硝化纖維素。7.在轉(zhuǎn)移緩沖液(配方如下)中浸泡薄膜、2片 Whatman 紙和 Western 儀器海綿2分鐘。8.將凝膠和薄膜組裝到夾層裝置中。9.將蛋白質(zhì)以140mA 的溫度在室溫下轉(zhuǎn)移6 ° C 0-90分鐘。10.轉(zhuǎn)移后，用 Tris 緩沖鹽水沖洗膜2分鐘。11.用封閉緩沖液(配方如下)在4 °C 下封閉膜過夜，或在室溫下封閉膜一小時(shí)。12.在補(bǔ)充有1% 無 Ig BSA 和0.1% 吐溫 -20的 Tris 緩沖鹽水中以1:1000起始稀釋度將封閉的印跡與一抗在4 °C 孵育過夜或在室溫下孵育2小時(shí)。13.用添加0.1% 吐溫20的 Tris 緩沖鹽水洗滌印跡。14.使用合適的第二抗體，如山羊抗兔 IgG 結(jié)合的 HRP (Cat。# AT0097-100ul，Engibody)或山羊抗小鼠 IgG 結(jié)合 HRP (Cat。# AT0098-100ul，Engibody)與您的化學(xué)發(fā)光試劑和儀器一起使用。故障排除指南西部印跡故障排除1。沒有信號(hào)。高背景3。非特定波段4。波段大小錯(cuò)誤5。黑色/灰色污點(diǎn)上的白色條紋6。“抹黑"1。故障排除: 無信號(hào)樣品準(zhǔn)備•未經(jīng)測(cè)試的物種？積極控制。檢查校準(zhǔn)。?樣本中或凝膠上的抗原不足。轉(zhuǎn)移到膜上•轉(zhuǎn)移不良。?過度清洗。阻塞•太多阻塞。優(yōu)化封閉劑、濃度和時(shí)間•交叉反應(yīng)封閉劑/抗體。抗體孵化和檢測(cè)•抗體不足。?第二抗體不正確。•檢測(cè)試劑盒舊基質(zhì)無效。2.故障排除: 高背景轉(zhuǎn)移到膜. 膜的選擇。阻塞•需要阻塞更長(zhǎng)時(shí)間。•優(yōu)化封堵劑、濃度。•封閉劑與一級(jí)或二級(jí)封閉劑之間的交叉反應(yīng)。?磷酸化特異性蛋白質(zhì): 使用酪蛋白阻斷。抗體孵化和檢測(cè)•一級(jí)抗體濃度過高。?孵化溫度過高。3.故障排除: 非特異性條帶樣品制備•細(xì)胞系在其蛋白質(zhì)表達(dá)譜上可以積累差異。•蛋白質(zhì)有多種修飾形式，改變了流動(dòng)性。目標(biāo)蛋白質(zhì)成片段-被蛋白酶降解或切割。•剪接變體/同種型或可能來自同一家族的蛋白質(zhì)。?蛋白質(zhì)的多聚體(二聚體)(還原和變性)。•樂隊(duì)可能不是特定的。運(yùn)行無主控制阻塞•阻塞不足。優(yōu)化注意力，時(shí)間。抗體孵化和檢測(cè)•一級(jí)或二級(jí)抗體濃度過高。抗體尚未提純。4.故障排除: 不正確的帶寬大小樣本準(zhǔn)備•確保樣本減少和變性，除非在數(shù)據(jù)表中另有說明。•檢查異構(gòu)體。•樣本是否為重組片段？這些將運(yùn)行在不同的大小。5.故障排除: 白色條帶/黑色印跡•過多的一級(jí)抗體和/或過多的二級(jí)抗體。6.故障排除: “涂抹"•過載，蛋白質(zhì)降解。

 

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