一、物理滅菌方法

1、干熱滅菌法

主要是針對(duì)金屬器械和玻璃器皿的消毒，將其放入電熱烘箱內(nèi)，在150~170℃下維持1~2h后，即可達(dá)到滅菌的目的；還有灼燒法滅菌，因其破壞力很強(qiáng)，故只適用于接種環(huán)、接種針的滅菌以及帶病原體材料、動(dòng)物尸體的焚毀等。

2、濕熱滅菌法

是一類利用高溫的水或水蒸氣進(jìn)行滅菌的方法，通常多指用100℃以上的加壓蒸汽進(jìn)行滅菌。在相同的溫度和作用時(shí)間下，濕熱滅菌比干熱滅菌更有效，因?yàn)闈駸嵴羝坏┩噶?qiáng)，而且還能破壞維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定的氫鍵，即加速這一生命大分子物質(zhì)的變性。

濕熱滅菌法主要有以下幾種：

（1）高壓蒸汽滅菌法

利用水的沸點(diǎn)隨水蒸氣壓力的增加而上升，以達(dá)到100 ℃以上高溫滅菌的方法。 

方法：121℃維持15-20min。112℃維持20-30min。115℃維持20-30min。

應(yīng)根據(jù)滅菌物品的性質(zhì)或成分選擇滅菌溫度。

例如：生理鹽水、營養(yǎng)瓊脂等培養(yǎng)基用121 ℃。

含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培養(yǎng)基用112 ℃。

適用：耐高溫物品，玻璃儀器、含水或不含水的物品。

（2）間歇滅菌法

將待滅菌物品在80-100℃蒸煮15-60min，冷卻后擱置室溫（28-37℃）下過夜，并重復(fù)以上過程三遍以上。

其蒸煮過程可殺死微生物的營養(yǎng)體，但不能殺死芽胞，室溫過夜促使殘留的芽孢萌發(fā)成營養(yǎng)體，再經(jīng)蒸煮過程可殺死新的營養(yǎng)體；循環(huán)三次以上可保證滅菌的目的。

適用于不耐高溫的物品滅菌，如不適于高壓滅菌的特殊培養(yǎng)基、藥品的滅菌。缺點(diǎn)是麻煩、費(fèi)時(shí)。

（3）巴氏消毒法

這是一種專用于牛奶、啤酒、果酒或醬油等不宜進(jìn)行高溫滅菌的液態(tài)風(fēng)味食品或調(diào)味料的低溫消毒方法。此法可殺滅物料中的無芽孢病原菌，且不影響其原有風(fēng)味。一般是在60~85℃下處理30分鐘至15秒。

（4）煮沸消毒法

顧名思義就是在100℃下煮沸數(shù)分鐘的方法，一般用于日常飲用水的消毒。

3、過濾除菌法

采用濾孔比細(xì)菌還小的篩子或?yàn)V膜作成各種過濾器，當(dāng)空氣或液體流經(jīng)篩子或?yàn)V膜時(shí)，微生物不能通過濾孔而被阻留在一側(cè)，從而達(dá)到滅菌的目的。但不能除去病毒。

實(shí)驗(yàn)室中常用的濾器：

濾膜過濾器、蔡氏過濾器、玻璃過濾器、磁土過濾器等。

過濾介質(zhì)：醋酸纖維素膜、硝酸纖維素膜、聚丙烯膜；

以及石棉板、燒結(jié)陶瓷、燒結(jié)玻璃等。

應(yīng)用：對(duì)于含酶、血清、維生素和氨基酸等熱敏物質(zhì)除菌。

4、輻射

紫外線滅菌

使用紫外燈照射，可以根據(jù)1W/M3來計(jì)算劑量，若以面積計(jì)算，一般30W的紫外燈可用于15M2的房間消毒，照射時(shí)間為20—30分鐘，有效照射距離為1米左右。

二、化學(xué)殺菌消毒

消毒劑:可以抑制或殺滅微生物，但對(duì)人體也可能產(chǎn)生有害作用的化學(xué)試劑。—主要用于抑制或殺滅物體表面、器械、排泄物和環(huán)境中的微生物。

防腐劑:可以抑制或阻止微生物生長(zhǎng)，但對(duì)人體或動(dòng)物體的毒性較低的化學(xué)藥劑。用于肌體表面，如皮膚、粘膜、傷口等處防止感染，也有的用于食品、飲料藥品的防腐作用。

但現(xiàn)時(shí)消毒劑和防腐劑間的界限已并不很嚴(yán)格。

消毒防腐劑的作用機(jī)理一般有下列三種方式:

1、使微生物蛋白質(zhì)凝固變性,發(fā)生沉淀.如酒精等。

2、破壞菌體的酶系統(tǒng),影響菌體代謝.如過氧化氫等。

3、降低微生物表面張力,增加細(xì)胞膜的通透性,使細(xì)胞發(fā)生破裂或溶解.如來蘇兒等酚類物質(zhì)。