【背景介紹】

Western Blot：蛋白免疫印跡，是將PAGE電泳分離后的蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，固相載體膜以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中。

Western Blot顯色的方法主要有以下幾種:

放射性自顯影

底物化學(xué)發(fā)光ECL

底物熒光ECF

底物DAB呈色

，文獻(xiàn)里最多，也是大家最熟悉的就是底物化學(xué)發(fā)光ECL。原理是二抗用HRP標(biāo)記:反應(yīng)底物為過氧化物+魯米諾，如遇到HRP，即發(fā)光，采集該發(fā)光信號(hào)，如暗盒壓膠片法，以及各種化學(xué)發(fā)光采集成像系統(tǒng)儀器。

Western blot 常用的幾種成像方法及優(yōu)劣勢如下：
 

在各種成像方法中，冷CCD化學(xué)發(fā)光成像由于具有操作簡單、靈敏度高、定量范圍寬等優(yōu)勢，成為了歡迎的成像方法，超過99%的科研人員再使用。

但是，隨著科研的不斷深入，科研人員反應(yīng)Western blot也越來越難做，科學(xué)家在Western bot方面面臨的難題具體表現(xiàn)在：

1.高豐度表達(dá)的蛋白都被做完了，剩下的盡是低豐度表達(dá)的蛋白，需要更加靈敏的成像技術(shù)。

2.容易獲取的樣品都被做完了，剩下的盡是不容易獲取的樣品，一份樣品要做多個(gè)實(shí)驗(yàn)，也是需要更加靈敏的成像技術(shù)，且要求實(shí)驗(yàn)盡量要一次能做成，沒有樣品用來做大量的條件優(yōu)化。

3.蛋白表達(dá)差異大的都被做掉了，剩下的盡是些蛋白表達(dá)差異不大，需要能準(zhǔn)確定量的成像技術(shù)。

雖然冷 CCD 化學(xué)發(fā)光成像方法有多種優(yōu)勢，被絕大多數(shù)人使用，但是由于其本身的技術(shù)限制，在面臨超低豐度蛋白、稀有樣品和表達(dá)差異不大的樣品時(shí)就顯得無能為力了，這些隨著科研逐步深入所帶來的難題急需新的技術(shù)出現(xiàn)來解決。
這些技術(shù)限制包括：

1.冷CCD成像儀器所用的芯片本身太小，大多只有 1 英寸或者更小，信號(hào)獲取的能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，導(dǎo)致微弱信號(hào)不能被采集到。

2.冷CCD成像儀器成像芯片本身的單個(gè)像素尺寸太小，邊長一般在3-6um之間，像素太小導(dǎo)致芯片本身儲(chǔ)存信號(hào)的能力太小，導(dǎo)致信號(hào)極易過度曝光，無法準(zhǔn)確定量。

3.冷CCD成像Western blot膜離CCD距離太遠(yuǎn)，導(dǎo)致絕大部分的光信號(hào)傳輸過程中直接損失掉了，并未到達(dá)CCD感光芯片，進(jìn)一步降低信號(hào)采集的能力。

4.冷CCD成像需要前面加一個(gè)鏡頭才能實(shí)現(xiàn)成像，鏡頭內(nèi)部都有一系列的透鏡組，這些透鏡組也會(huì)將本就非常微弱的化學(xué)發(fā)光信號(hào)阻擋掉一大半。

5.冷CCD成像所需成像時(shí)間太長，CCD本身的噪音隨著時(shí)間的延長會(huì)隨之積累，弱信號(hào)會(huì)被這些噪音所掩蓋掉以至于不能成像。

eBlot接觸式成像技術(shù)，是成像領(lǐng)域的革命性突破。這項(xiàng)革命性創(chuàng)新的技術(shù)克服了現(xiàn)有技術(shù)在成像靈敏度、定量范圍、成像速度和儀器體積大等諸多瓶頸，實(shí)現(xiàn)了Western Blot成像技術(shù)新的飛躍。

【產(chǎn)品概述】

1.E-Blot采用超大尺寸感光芯片，讓Western Blot化學(xué)發(fā)光成像進(jìn)入新時(shí)代。不同于傳統(tǒng)的暗室壓片，不同于常用的制冷CCD圖像采集，E-Blot讓樣品和感光芯片親密接觸，兼顧光學(xué)膠片的高靈敏以及CCD相機(jī)的方便性。

2.E-Blot有超寬的動(dòng)態(tài)采集范圍，可以對(duì)弱信號(hào)、強(qiáng)信號(hào)同時(shí)捕捉，整個(gè)過程非常優(yōu)雅。

3.沒有長時(shí)間的等待，沒有各種條件摸索，眨眼間幾秒時(shí)間就能得到真實(shí)的數(shù)據(jù)。

4.E-Blot尺寸比A4紙還小，裸機(jī)不到1kg。獲得德國紅點(diǎn)設(shè)計(jì)獎(jiǎng)，型于外而慧于中。

5.Touch viewer操作、分析軟件能夠便捷的進(jìn)行圖像采集、分析等工作，非常便捷。

【產(chǎn)品參數(shù)】