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細胞培養常見問題的解答
1.何時須更換培養基?
視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本資料上之更換時間,按時更換培養基即可。
2.可否使用與原先培養條件不同之培養基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基,若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活。
3.如何選用特殊細胞系培養基?
培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,選MEM做粘附細胞培養、 RPMI-1640做懸浮細胞培養是一個好的開始。
4.培養細胞時應使用5 %或10% CO2?或根本沒有影響?
一般培養基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統,而培養基中NaHCO3的含量將決定細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時,細胞培養時應使用10 % CO2;當培養基中NaHCO3為每公升1.5 g時,則應使用5 % CO2培養細胞。
5.冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管之爆裂。
6.怎樣離心回收細胞?
欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg (約1000rpm),5 - 10分鐘,過高之轉速,將造成細胞死亡。
7.細胞冷凍培養基之成份為何?
動物細胞冷凍保存時經常使用的冷凍培養基是含5 - 10 %DMSO (dimethyl sulfoxide)和90 - 95 %原來細胞生長用之新鮮培養基均勻混合之。注意:由于 DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成。
8.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養基配制是減低污染的好方法。
9.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
10.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳,原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。 培養溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久。
11.什么培養基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養基中用作PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。
蘇州千舍生物細胞庫細胞明細
293(HEK-293) | 人胚腎細胞 |
5637 | 人膀胱癌細胞 |
293A | 人胚腎細胞 |
22RV1 | 人前列腺癌細胞 |
293T | 人胚腎細胞 |
3T3-L1 | 小鼠胚胎成纖維細胞 |
4T1 | 小鼠乳腺癌細胞 |
6T-CEM | 人T細胞白血病細胞 |
769-P | 人腎細胞腺癌細胞 |
786-O(786-0) | 人腎透明細胞癌細胞 |
95-D | 人高轉移肺癌細胞 |
A172 | 人腦膠質瘤細胞 |
A2780 | 人卵巢癌細胞 |
A-375 | 人惡性黑色素瘤細胞 |
A-431 | 人表皮癌細胞 |
A549 | 人非小細胞肺癌細胞 |
A-673 | 人非小細胞肺癌細胞 |
A9 | 小鼠皮下結締組織細胞 |
AAV-293 | 人胚腎細胞 |
Acc-2 | 人涎腺腺樣囊性癌細胞 |
ACHN | 人腎癌細胞 |
AGS | 人胃腺癌細胞 |
Ana-1 | 小鼠巨噬細胞 |
Anglne | 人卵巢癌細胞 |
AR42J | 大鼠胰腺外分泌細胞 |
ARPE-19 | 人視網膜上皮細胞 |
AsPC-1 | 人轉移胰腺腺癌細胞 |
AtT-20 | 小鼠垂體瘤細胞 |
B16 | 小鼠黑色素瘤細胞 |
Bcap-37 | 人乳腺癌細胞 |
BEL-7402 | 人肝癌細胞 |
BEL-7404 | 人肝癌細胞 |
BGC-823 | 人胃癌細胞 |
BHK-21 | 倉鼠腎細胞 |
BIU-87 | 人膀胱癌細胞 |
BRL 3A | 大鼠正常肝細胞 |
BNL CL.2 | 小鼠胚胎肝細胞 |
BRL | 大鼠肝細胞 |
BS-C-1 | 非洲綠猴腎細胞 |
BT-474 | 人乳腺導管癌細胞 |
BT-549 | 人乳腺管癌細胞 |
BxPC-3 | 人原位胰腺腺癌細胞 |
C127 | 小鼠乳腺癌細胞 |
C2C12 | 小鼠成肌細胞 |
C-33 A | 人子宮頸癌細胞 |
C4-2 | 人前列腺癌細胞 |
C6 | 大鼠腦膠質瘤細胞 |
Ca Ski | 人宮頸癌腸轉移細胞/人宮頸癌上皮細胞 |
CA46 | 人Burkitts淋巴瘤細胞 |
Caco-2 | 人結直腸腺癌細胞 |
CaES-17 | 人食管癌細胞 |
Caki-1 | 人腎透明細胞癌細胞 |
Calu-1 | 人肺癌細胞 |
Calu-3 | 人肺腺癌細胞 |
Caov-3 | 人乳突狀卵巢腺癌細胞 |
CCD-1095Sk | 人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞 |
L2 | 大鼠肺泡上皮細胞 |
CCRF-CEM | 人急性淋巴白血病細胞 |
CFPAC-1 | 人胰腺癌細胞 |
CHL | 倉鼠肺細胞 |
CHO | 倉鼠卵巢細胞 |
CHO-K1 | 倉鼠卵巢細胞亞株 |
CNE | 人鼻咽癌細胞 |
CoC1 | 人卵巢癌細胞 |
CoC1/DDP | 人卵巢癌細胞CoC1順鉑耐藥亞株 |
COLO 205 | 人結腸癌細胞 |
COLO 320DM | 人結腸癌細胞 |
COS-1 | 非洲綠猴SV40轉化的腎細胞 |
COS-7 | 非洲綠猴SV40轉化的腎細胞 |
CRFK | 貓腎細胞 |
CT26.WT | 小鼠結腸癌細胞 |
Daudi | 人淋巴瘤細胞 |
DH82 | 犬巨噬細胞(狗腎惡性組織細胞增生癥細胞) |
DLD-1 | 人結腸腺癌細胞 |
DU 145 | 人前列腺癌細胞 |
EAC | 小鼠艾氏腹水癌細胞 |
Eca-109 | 人食管癌細胞 |
EL4 | 小鼠淋巴瘤細胞 |
ES-2 | 人卵巢透明細胞癌細胞 |
WB-F344 | 大鼠肝上皮樣干細胞 |
F81 | 貓腎細胞 |
F9 | 小鼠畸胎瘤細胞/小鼠胚胎癌細胞 |
FaDu | 人咽鱗癌細胞 |
FRhK-4 | 恒河猴胚腎細胞 |
GBC-SD | 人膽囊癌細胞 |
GNM | 人口腔鱗癌頸淋巴結轉移癌細胞 |
H4 | 人腦神經膠質瘤細胞 |
H-4-II-E | 大鼠肝細胞瘤 |
H9c2(2-1) | 大鼠胚胎心肌細胞 |
Hacat | 人永生化角質形成細胞 |
HBL-100 | 人整合SV40基因的乳腺上皮細胞 |
HBZY-1 | 大鼠腎小球系膜細胞 |
HCC1937 | 人乳腺癌細胞 |
HCC827 | 人非小細胞肺癌細胞 |
HCCC-9810 | 人肝內膽管癌細胞 |
HCT 116 | 人結腸癌細胞 |
HCT-15 | 人結腸癌細胞 |
HCT-8 | 人盲腸腺癌細胞 |
HEC-1-A | 人子宮內膜腺癌細胞 |
HEC-1-B | 人子宮內膜腺癌細胞 |
HeLa | 人宮頸癌細胞 |
Hep 3B(Hep 3B2.1-7) | 人肝癌細胞 |
Hep G2 | 人肝癌細胞 |
HEp-2 | 人喉表皮癌細胞 |
Hepa 1-6 | 小鼠肝癌細胞 |
HFL1 | 人胚肺成纖維細胞 |
HGC-27 | 人胃癌細胞(未分化) |
HIC | 人小腸癌細胞 |
HK-2 | 人腎皮質近曲小管上皮細胞 |
HL-60 | 人早幼粒急性白血病細胞 |
HL-7702(L-02) | 人肝正常細胞 |
HMy2.CIR | 人B淋巴母細胞 |
HO-8910 | 人卵巢癌細胞 |
Hs 578T | 人乳腺癌細胞 |
Hs-746T | 人胃癌細胞 |
HSC-T6 | 大鼠肝星形細胞 |
HT-1080 | 人纖維肉瘤細胞 |
HT-29 | 人結腸癌細胞 |
HuH-6 | 人肝母細胞瘤細胞 |
HuH-7 | 人肝癌細胞 |
HuT 102 | 人T淋巴瘤細胞 |
HUVEC(HUV-EC-C) | 人臍靜脈血管內皮細胞 |
IBRS-2 | 豬腎細胞 |
IMR-32 | 人神經母細胞瘤細胞 |
J82 | 人膀胱移行細胞癌 |
JAR | 人胎盤絨毛膜癌細胞 |
JEG-3 | 人絨毛膜癌細胞 |
JeKo-1 | 人套細胞淋巴瘤細胞 |
Jurkat, Clone E6-1 | 人急性T淋巴細胞白血病細胞/人淋巴細胞瘤細胞 |
K-562 | 人慢性骨髓性白血病細胞 |
KB | 人口腔表皮樣癌細胞 |
KG-1 | 人急性骨髓性白血病細胞 |
KLE | 人子宮內膜癌細胞 |
KU812 | 人外周血嗜堿性白血病細胞 |
L1210 | 小鼠白血病細胞 |
L6 | 大鼠成肌細胞 |
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] | 小鼠成纖維細胞 |
Lec1 | 倉鼠卵巢細胞 |
Li-7 | 人肝癌細胞 |
LLC | 小鼠肺癌細胞 |
LLC-MK2 | 恒河猴腎細胞 |
LM/TK(LMTK-) | 小鼠胸腺激酶缺陷細胞 |
Lncap clone FGC | 人前列腺癌細胞 |
LoVo | 人結腸癌細胞 |
LS 174T | 人結腸腺癌細胞 |
LTEP-a-2 | 人肺腺癌細胞 |
MA-782 | 小鼠乳腺癌細胞 |
MADB106 | 大鼠乳腺癌細胞 |
MCF-7 | 人乳腺癌細胞 |
MDA-MB-231 | 人乳腺癌細胞 |
MDA-MB-435S | 人乳腺導管癌細胞 |
MDA-MB-453 | 人乳腺癌細胞 |
MDBK(NBL-1) | 牛腎細胞 |
MDCK(NBL-2) | 犬腎細胞 |
ME-180 | 人子宮頸表皮癌細胞 |
MFC | 小鼠胃癌細胞 |
MG-63 | 人骨肉瘤細胞 |
MGC80-3 | 人胃癌細胞 |
MLTC-1 | 小鼠睪丸間質細胞瘤細胞 |
MOLT-4 | 人急性淋巴母細胞白血病細胞 |
MRC-5 | 人胚肺成纖維細胞 |
MS1 | 小鼠胰島內皮細胞 |
MSTO-211H | 人肺癌細胞株 |
NAMALWA | 人Burkitt's淋巴瘤細胞 |
NCI-H1299 | 人非小細胞肺癌細胞 |
NCI-H1650 | 人非小細胞肺癌細胞 |
NCI-H292 | 人肺癌細胞(淋巴結轉移) |
Neuro-2a[N2a] | 小鼠腦神經瘤細胞 |
NCI-N87 | 人胃癌細胞 |
NG108-15[108CC15] | 小鼠神經細胞瘤與大鼠神經膠質瘤之融合細胞 |
NIH/3T3 | 小鼠胚胎細胞 |
NR8383 | 大鼠肺泡巨噬細胞 |
NRK | 正常大鼠腎細胞 |
NRK-52E | 大鼠腎小管導管上皮細胞 |
OK | 負鼠腎小管細胞 |
OP9 | 小鼠骨髓基質細胞 |
OS-RC-2 | 人腎癌細胞 |
OVCAR-3 | 人卵巢癌細胞 |
P19 | 小鼠畸胎瘤細胞 |
P388D1 | 小鼠淋巴樣瘤細胞 |
P3X63Ag8 | 小鼠骨髓瘤細胞 |
P815 | 小鼠肥大細胞瘤細胞 |
PA317 | 小鼠成纖維細胞 |
PANC-1 | 人胰腺癌細胞 |
PC-3 | 人前列腺癌細胞 |
PIEC | 豬髖動脈內皮細胞 |
PK-15 | 豬腎細胞 |
QGY-7701 | 人肝癌細胞 |
Raji | 人Burkitt's淋巴瘤細胞 |
RAW 264.7 | 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 |
RBE | 人肝膽管癌細胞 |
RBL-2H3 | 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞 |
RD | 人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞 |
RF/6A | 猴脈絡膜-視網膜內皮細胞 |
RH-35 | 大鼠肝癌細胞 |
RKO | 人結腸腺癌細胞 |
RL95-2 | 人子宮內膜癌細胞 |
RM-1 | 小鼠前列腺癌細胞 |
RSC96 | 大鼠雪旺細胞 |
RWPE-1 | 人前列腺上皮細胞 |
S-180 | 小鼠腹水瘤細胞/小鼠肉瘤細胞 |
Saos-2 | 人成骨肉瘤細胞 |
SCaBER | 人膀胱鱗癌細胞 |
Sf21 | 昆蟲卵巢細胞 |
Sf9 | 昆蟲卵巢細胞 |
SGC-7901 | 人胃癌細胞 |
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