精品亚洲a∨无码专区毛片-精品亚洲aⅴ无码午夜在线-精品亚洲aⅴ无码午夜在线观看-精品亚洲aⅴ无码一区二区三区-精品亚洲aⅴ无码专区毛片-精品亚洲aⅴ在线

蘇州千舍生物科技有限公司

外泌體樣本收集

時間:2022-2-16閱讀:1407
分享:

    外泌體是由細胞分泌的納米級膜性小囊泡,直徑約30~150nm。外泌體來源多樣,廣泛存在并分布于各種生物液體中,富含來源細胞的蛋白質、脂質和核酸,參與細胞間的信息交流。不同病理和生理條件下,外泌體的內容物不盡相同,因此外泌體可以很好地反映生物體的疾病與健康狀態。此外,外泌體特殊的膜結構能夠保護其內容物如RNAmicroRNAmRNAlncRNAcircRNA)免受酶的降解,保證其能在各類體液中被穩定檢測到,因此外泌體是研究各種疾病的良好生物學材料,可作為腫瘤潛在的biomarker和治療靶點,亦可作為基因/藥物的遞送載體,在疾病的診斷和治療方面具有廣闊的應用前景。

據統計,2019年國自然中標的外泌體相關項目總計600多項,總金額高達2.5億,相較2018年,總金額增長了44.5%,足可見外泌體研究的火熱程度。近幾年,隨著高通量檢測技術的飛速發展,對外泌體進行組學研究極大地推動了外泌體的研究進展。伯豪生物致力于科研服務,擁有高標準的樣品處理平臺、微陣列芯片平臺、高通量測序平臺、生物標志物平臺、生物信息分析平臺等多個平臺,能夠實現外泌體分離、鑒定、內含物(蛋白質、mRNAncRNA)檢測及驗證的“一站式”外泌體研究服務。

那么如何開展外泌體研究,第一步也是相當重要的一步就是收集外泌體含量高的樣本。外泌體存在于各種生物體液中,如血液、乳汁、尿液,腦脊液,那么如何有效的收集各種類型的樣本用于后續的外泌體分離呢,下面我們來簡單介紹下各類型外泌體樣本的具體收集方法。

注意:收集血清樣本時一定不能加入抗凝劑。

 

1) 采集外周血(建議早晨空腹抽血),迅速轉入不含EDTA的試管中;

 

2) 室溫(22~25℃)下靜置30分鐘,或4℃下靜置3~4小時,可見自行凝固;

 

3) 吸取上清至新的離心管中,4℃,8200×g離心10分鐘;

 

4) 吸取上清至新的離心管中,4℃,16000×g離心10分鐘;

 

5) 小心吸取上清至新的離心管中(1.5ml離心管,每管不超過1ml), -80℃保存;

 

6)干冰寄送樣本。

 

提示:建議送樣量5 mL 以上(大致需全血8-10mL

 

血漿

 

注意:收集血漿樣本用于RNA研究時一定不要用肝素抗凝管。

 

1) 采集外周血(建議早晨空腹抽血),迅速轉入EDTA抗凝管中,渦旋或顛倒混合510 次;

 

2) 1小時(室溫)或2小時(4℃)內進行血漿分離,8200×g離心10分鐘;

 

3) 吸取上清至新的離心管中,4℃,16000×g離心10分鐘;

 

4) 小心吸取上清至新的離心管中(1.5ml離心管,每管不超過1ml),-80℃保存;

 

5)干冰寄送樣本。

 

提示:建議送樣量5 mL以上(大致需全血8-10mL

Tips: 血液樣本外泌體研究血清好還是血漿好?

血漿=血液-血細胞;血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子;血清是血液凝固之后收集的液體,在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,有研究發現血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌,所以一般實驗會選擇血漿。在特殊情況下,如研究與血小板相關疾病的時候,血清比血漿更適合。此外,在采血后最好盡快處理樣本,因血液收集到收集管后,血細胞和血小板會繼續分泌外泌體

 

細胞上清

 

注意:細胞培養基必須使用去除外泌體的血清或者無血清培養基

 

1) 正常含有血清的培養基中培養細胞24h左右,貼壁細胞密度達到70%~80%,懸浮細胞密度達到60%~70%

 

2) 將原有血清培養基更換為去除外泌體的血清或者無血清培養基(貼壁細胞直接去除原有培養基,加入適量PBS緩沖液沖洗一次,更換新的培養基;懸浮細胞4℃,300×g離心10分鐘,收集細胞后,加入適量PBS緩沖液沖洗一次,更換新的培養基)繼續培養;

 

3) 培養48-72小時后,根據細胞數量確定收取上清時間;

 

4) 4℃,300×g,離心10分鐘收集細胞上清;

 

5) 4℃,3000×g,離心15分鐘,確保將細胞及細胞碎片去除干凈;

 

6) 吸取上清,-80℃保存;

 

7)干冰寄送樣本。

 

提示:送樣量最好在50 mL 以上,不少于30ml

 

尿液

 

1) 收集清晨第一次尿液50ml,注意避免細菌污染,收集前注意飲食控制,前一晚22:00后禁食禁水;

 

2) 4 ℃ ,3000×g,離心15分鐘,去除細胞或細胞碎片;

 

3) 收集上清尿液分裝轉移至15ml離心管中,-80℃保存;

 

4)干冰寄送樣本。

 

提示:送樣量最好在50 mL 以上

 

腦脊液

 

1) 收集腦脊液,收集過程中避免血液污染;

 

2) 3000×g,離心15分鐘,去除細胞或細胞碎片;

 

3) 收集上清,-80℃冰箱中保存;

 

4)干冰寄送樣本。

 

提示:送樣量最好在20 mL 以上

 

注:以上建議的送樣量綜合考慮了外泌體的表征檢測(TEMNTAWB)和組學研究(轉錄組、蛋白質組)的樣本需求量。上述細胞上清送樣量主要指常規腫瘤細胞,對于其他類型細胞,最好在送樣前進行預實驗,以確定外泌體含量。

 

目前外泌體的分離方法中應用廣泛的是超速離心法和試劑盒抽提法,超速離心法是外泌體分離的金標準,是高分文章常用的分離方法,獲得的外泌體純度高。其原理主要是依據外泌體與其他微小囊泡密度和大小的不同而分離,通過逐步提高離心速度,有效去除細胞、細胞碎片和大囊泡,收集高純度的外泌體。外泌體抽提試劑盒分離外泌體省時省力,外泌體純度高,SBI外泌體抽提試劑盒,樣本需求量少,最少可從100ul血清或5ml細胞上清中分離外泌體。利用超離或試劑盒法分離獲得的外泌體,經表征檢測確定后即可進行后續的組學研究。

WinSera無外泌體血清,千舍生物新品~~歡迎了解

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~

以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,化工儀器網對此不承擔任何保證責任。

溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。

撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 色综合网站国产麻豆| 久久无码人妻一区二区三区午夜 | 2024韩国伦理电影| 美国毛片免费看 | 日本高清视频免费看| 婷婷四房综合激情五月性色| 国产精品久久午夜夜伦鲁鲁| 天堂在线中文网| 一本道久久爱88AV俺也去| 国产成人无码情景v| 日韩精品一区二区三区| 亚洲欧洲日本无在线码天堂| 二区乱码噜噜狠狠色综合久色aⅴ| 人妻无码中文人妻有码| 国产真人性做爰久久网站 | 欧美真人性做爰一二区欧美影院| 国产精品乱人一区二区三区| 日本艳星一区二区三区四区| 秋霞在线骑兵区| 北条麻妃高清无码中文| 久久久久免费毛a片免费一瓶梅| 国产精品精品国产| 无码一区二区三区在线观看| 护士交换做爰4| 亚洲欧美动漫少妇自拍| 一级毛片在线视频| 国产成人一区二区三区传媒| 日本三级黄色网址| 国产亚洲精品欧洲在线视频 | 免费看国产曰批40分钟| 99在线精品免费视频| 99久久亚洲| 久久久久亚洲aⅴ成人无码电影| 自拍日韩美国av| 午夜福利一区二区三区在线观看| 国产亚洲综合精品一区二区三区| 亚洲AV无码乱码国产麻豆穿越| 中文字幕欧美在线观看| 国产成人精品综合久久久| 人妻激情| 狠狠色丁香婷婷综合|