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蘇州千舍生物科技有限公司

收集腫瘤細胞外泌體

時間:2022-3-28閱讀:1172
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外泌體的研究離不開細胞培養。以腫瘤相關外泌體研究為例,目前,收集腫瘤細胞外泌體主要有兩種方法:

方法一

使用正常培液養細胞再換無血清培液收外泌體。

方法二

直接使用exosome-free FBS配制培養基用于培養細胞收外泌體。

首先,就是基本的離心條件了,目前超離比較好的就是貝克曼或者日立的了,這兩家超離在行業內算是翹楚了。其次就是離心參數了:120000 g,4℃,離心14h,離心結果如圖:

11.jpg


1:離心后,血清外泌體會富集在管底和管壁;

2:吸取血清時,只吸取澄清部分的血清,并且遠離上圖中標記的區域;

3:吸取70-80%的澄清的血清;(注意:動作慢,動作輕)

4:其余的渾濁血清留作正常細胞的的營養物添加使用,避免浪費。

5:如果覺得純度不夠,再把離心后收集的血清做二次超速離心。

6:針對超速離心后的血清,必須進行粒徑檢測(離心前樣品和離心后樣品),該數據可以放到文章補充材料中,用來證明無血清外泌體制備成功。


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