當前位置:蘇州千舍生物科技有限公司>>技術文章>>ELISA試劑盒代測之 固體樣本處理問題
1、組織樣本必須保持鮮重,如果是凍存的組織,應該室溫平行2小時以上,然后用生理鹽水沖洗干凈,再用濾紙把周圍的水分吸干,稱重!組織重量不能低于50mg。
2、組織勻漿液選取是PBS(PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol/L)勻漿的比例為1:10,相當于1g組織加9ml的勻漿液。
3、組織勻漿后,離心取上清,離心轉數為5000轉,但不能超過5000轉,時間為15分鐘。
4、實驗中老師樣本提取的是200mg的樣本加1.8ml的勻漿液。
土壤樣本處理一般分為2個步驟,第一個步驟是測定含水率,第二個步驟是進行勻漿,按照10%混勻離心取上清待檢。具體操作如下。
第一部分:
1、稱取土壤500mg左右,必須保持鮮重,按照重量和體積比加入1:10的PBS溶液(PBS的濃度為0.01mol/L,PH控制在7.2-7.4),例如稱取的是0.5g加入5ml的PBS,稱取的重量不要求保持一致,但勻漿的比例都是按照1:10的關系來。
2、進行渦旋震蕩,充分混勻,渦旋時間30秒。
3、離心取上清,離心轉速為4000轉每分,時間為15分鐘左右,取上清液待檢。
第二部分:
稱取500mg左右的樣本,進行烘干,前后稱取重量,測定含水率。(這個是為后期剔除掉含水率)
1、稱取樣本中的重量不小于50mg,一般以1g為基準,但不嚴格要求固定樣本每個重量必須達到相同的水平。
2、勻漿的比例選取10%,相當于1g糞便加9ml的勻漿液來進行勻漿。
3、勻漿液選取PBS(PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol/L)。
4、離心取上清,離心轉速選用5000轉每分,時間是15分鐘。取上清液待檢!
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