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當(dāng)前位置:蘇州千舍生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>千舍--熒光標(biāo)記的選擇指南
對于流式檢測最初的一步就是選擇何種方法,通常是何種熒光物質(zhì)標(biāo)記的抗體。廠家根據(jù)需要開發(fā)了各種熒光標(biāo)記的抗體,進(jìn)行選擇時(shí)首先要滿足的就是所選擇的抗體必須在流式上能夠檢測,各單位買的流式儀功能不*一致,首先要和檢測方進(jìn)行聯(lián)系,看能否檢測。在附表里我將常用的熒光標(biāo)記物質(zhì)的激發(fā)波長和檢測波長給出,可以參考。有幾個(gè)原則一起說一下:
1、流式檢測時(shí)*熒光物質(zhì)直接標(biāo)記的抗體,如果沒有直接標(biāo)記的抗體,用間接發(fā),即二抗上標(biāo)記熒光分子同樣可以。不過這增加了處理的難度,處理步驟增多,往往會不同程度影響檢測結(jié)果。
2、廠家推出的抗體有一些明確寫明適合流式檢測,而另一些則表明適合免疫組化、western等,選擇前者,可以保質(zhì)保量,但是后者并不是不可以用,一般來說如果沒有明確的表明適合流式檢測的抗體,采用后者也是可以的,不過要注意其檢測結(jié)果不一定非常理想。
3、單抗和多抗均可應(yīng)用。
4、綠色熒光蛋白等本身有熒光的物質(zhì)在檢測時(shí)會占據(jù)一個(gè)熒光通道,我也曾碰到幾次有人將轉(zhuǎn)了綠色熒光蛋白的細(xì)胞再采用FITC標(biāo)記的抗體來檢測目的蛋白(據(jù)說還有人用此方法得出了滿意的結(jié)果!),豈不知綠色熒光蛋白和FITC是一個(gè)熒光通道,更本不能一起檢測。
5、如果是檢測淋巴細(xì)胞這類細(xì)胞,經(jīng)常用到多種抗體同時(shí)標(biāo)記,選擇時(shí)切勿選錯(cuò)。我自己比較傾向于多重標(biāo)記,因?yàn)檫@樣可以減少抗體和細(xì)胞用量,特別是對于小鼠的血標(biāo)本,經(jīng)常采到的血量微少,采用多重標(biāo)記更有利。當(dāng)然這要求流式操作者有較高的水平,注意調(diào)節(jié)流式儀的各種參數(shù)。
蘇州千舍熱賣熒光標(biāo)記細(xì)胞:
人肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 A549+luc
人膽囊癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 GBC-SD+LUC
人永生化表皮細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HACAT+LUC
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HCC827+LUC
人結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HCT116+LUC
人宮頸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HELA+LUC
人胃癌細(xì)胞黃色熒光標(biāo)記 HGC-27+YFP
人結(jié)直腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 LOVO+LUC
人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MCF-7+luc
人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MDA-MB-231+LUC
人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MHCC-97H+luc
人胃癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 NCI-N87+LUC
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 SK-MEL-2+LUC
人卵巢癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 SK-OV-3+LUC
人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 U251 MG/TMZ+LUC(3000)
人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 ZR-75-1+luc
小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 4T1+luc
小鼠黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 B16-F10+LUC
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 CT26+LUC
小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤熒光素酶標(biāo)記 GL-261+luc
小鼠肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HEPA1-6+LUC
小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 ID8+LUC
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC
小鼠肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 LLC+LUC
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MC38+LUC
小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 neuro-2a+luc
小鼠胰腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 panc02+LUC
小鼠前列腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 RM-1+LUC
大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞綠色熒光標(biāo)記 C6+LUC
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