細胞系特征 | ||
編號:WS-HCT002 細胞株名稱:HCT116/L人結腸癌耐奧沙利鉑細胞株 種屬:人 組織來源:結腸癌 生長特性:貼壁生長 形態特征:上皮細胞 微生物及支原體檢測:陰性 安全性:所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。 | ||
培養條件:
| wan全培養基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+2000ng/ml L 血清我們推薦用: GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。 培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% | |
傳代方法:
| 收到細胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。 (一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養液后繼續培養。 (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下: 1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。 2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細胞脫落后,加入2ml 以上wan全培養基中止消化。 3. 按6-8ml/瓶補加wan全培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。 注:1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。 2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。 3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。 4、收到細胞后,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯系。..
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凍存方法: | 凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO 儲存:液氮儲存 |
HCT116/L人結腸癌耐奧沙利鉑細胞株,細胞很容易消化過度,一定要注意注意!!耐藥株細胞收到后一定要先保種,先保種~·
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