產(chǎn)品名稱:大鼠神經(jīng)鞘瘤細(xì)胞RT4-D6P2T
貨號(hào):QS-R006
細(xì)胞規(guī)格:1-3×10^6細(xì)胞量
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
培養(yǎng)液:DMEM(H)+10%FBS
凍存條件:80%*培養(yǎng)液+10%FBS+10%DMSO
運(yùn)輸方式:常溫順豐運(yùn)輸和干冰順豐運(yùn)輸
貨 期:復(fù)蘇細(xì)胞需要1-2周,凍存細(xì)胞的需要3-5天(特殊情況會(huì)有說明)
質(zhì) 控:無支原體、無污染、符合標(biāo)準(zhǔn)
研究范圍:僅供科研使用
我司是一家專注于生命科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè),在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,一站式采購商城,代理亞洲、歐美國(guó)家300多種品牌,200萬種以上產(chǎn)品。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó),在同行獲得*。
大鼠神經(jīng)鞘瘤細(xì)胞RT4-D6P2T
我司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品是國(guó)內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購!
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細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),由于不同細(xì)胞來源不同的組織器官環(huán)境,其體外培養(yǎng)所需的養(yǎng)分不盡相同,選擇合適的培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞的培養(yǎng)至關(guān)重要。
按培養(yǎng)基的來源可分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基(目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基)。按其物質(zhì)狀態(tài)可分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類,干粉培養(yǎng)基需由實(shí)驗(yàn)者自己配制并滅菌(可靈活配制配比),液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供(用戶可直接使用,非常方便)。
合成培養(yǎng)基成分
主要成分有:氨基酸、碳水化合物、無機(jī)鹽、維生素及其它輔助物質(zhì)。
氨基酸:是組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同種類的細(xì)胞對(duì)氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細(xì)胞自身不能合成,必須依靠培養(yǎng)液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。因此,各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培養(yǎng)液內(nèi)。已含谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲(chǔ)存2 周以上時(shí),還應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。
維生素:在細(xì)胞培養(yǎng)中,盡管血清是維生素重要來源,但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細(xì)胞系生長(zhǎng)。
碳水化合物:是細(xì)胞生長(zhǎng)主要能量來源,其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。
無機(jī)鹽:培養(yǎng)液中無機(jī)鹽的主要功能是幫助細(xì)胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素,細(xì)胞通常可耐受260mOsm/kg~320 mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動(dòng)。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會(huì)明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES 時(shí)需按以下“緩沖系統(tǒng)”方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。
緩沖系統(tǒng):大多數(shù)細(xì)胞所需pH 在7.2 - 7.4。但是,細(xì)胞培養(yǎng)zui適pH 值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH (7.4 - 7.7), 而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2 體系進(jìn)行緩沖,因此,氣相中的CO2 濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2 濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為1.97g/L;如果CO2 濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為3.95g/L。同時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,以保證氣體交換。HEPES 是一種非離子緩沖液,在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES 引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。
其它成分:
在一些較為復(fù)雜的培養(yǎng)液中還包括其它一些成分,如:
(1)非必需氨基酸:有些細(xì)胞需要額外添加。
(2)丙酮酸鈉:是糖酵解的中間產(chǎn)物,可直接進(jìn)出細(xì)胞,作為替代碳源添加。
(3)胰島素:可以促進(jìn)細(xì)胞增殖。
(4)qing化可的松:可促進(jìn)表皮細(xì)胞生長(zhǎng)。
(5)IL-2:促進(jìn)淋巴細(xì)胞生長(zhǎng),NK92依賴等。
(6)地塞米松:激素類,促進(jìn)部分細(xì)胞生長(zhǎng)。
(7)腎上腺素:促進(jìn)部分細(xì)胞生長(zhǎng)。
(8)轉(zhuǎn)鐵蛋白:為細(xì)胞內(nèi)化和細(xì)胞代謝提供所需的鐵。
(9)2-qiu基乙chun(2-Mercaptoethanol,2-Me):2-Me的活性部分是硫氫基,其中一個(gè)重要作用是使血清中含硫的化合物還原成谷胱甘肽,能誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖,為非特異性的激活作用。另一個(gè)重要作用是促進(jìn)分裂原的反應(yīng)和DNA 合成,增加植物凝集素(PHA)對(duì)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用。
液體培養(yǎng)基保存
液體培養(yǎng)基應(yīng)于4℃冰箱避光保存,實(shí)驗(yàn)前放入37℃預(yù)熱。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為12個(gè)月。液體培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)而慢慢分解。如果細(xì)胞生長(zhǎng)不良,可以再添加適量L-谷氨酰胺。
干粉培養(yǎng)基保存
4℃冰箱避光保存,有效期36個(gè)月。
血清
細(xì)胞培養(yǎng)液中添加的血清有牛血清、馬血清、人血清等,其中牛血清是zui常用的血清,分為胎牛、新生牛和小牛血清。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清,價(jià)格昂貴。新生牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來的血清,如廠家能做到這一點(diǎn),新生小牛血清的質(zhì)量與胎牛血清的質(zhì)量相差不大。小牛血清,如小牛出生后已哺乳,從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質(zhì),其質(zhì)量明顯不如前兩種。
血清的質(zhì)量,種類及使用的濃度都有可能影響細(xì)胞的生長(zhǎng),而不同批次的血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力也不同,尤其是對(duì)克隆細(xì)胞的生長(zhǎng),某些批次血清可能含有毒性或抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的物質(zhì)。因此,在購買大量血清之前,必須對(duì)血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)能力進(jìn)行檢測(cè),然后再大量購買質(zhì)量好的同一批號(hào)的血清,并注意以下幾點(diǎn):
(1)需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃–-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?/span>
(2)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃ 進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
(4)熱滅活是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
(5)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量。
(6)血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量。可用離心3000rpm, 5 分鐘去除,也可不用處理。
(7)顯微鏡下“小黑點(diǎn)”:經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點(diǎn)”,常誤認(rèn)為血清受污染。一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清。