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蘇州千舍生物科技有限公司

當(dāng)前位置:蘇州千舍生物科技有限公司>>細(xì)胞系>>小鼠細(xì)胞>> QS-M030特惠產(chǎn)品小鼠單核巨噬細(xì)胞J774A.1

特惠產(chǎn)品小鼠單核巨噬細(xì)胞J774A.1

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)QS-M030

品牌其他品牌

廠(chǎng)商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所在地蘇州市

更新時(shí)間:2023-12-20 14:48:43瀏覽次數(shù):1259次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
特惠產(chǎn)品小鼠單核巨噬細(xì)胞J774A.1
我司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品是國(guó)內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無(wú)外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無(wú)血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善,我們以飽滿(mǎn)的熱情歡迎新老客戶(hù)選購(gòu)!

產(chǎn)品名稱(chēng):特惠產(chǎn)品小鼠單核巨噬細(xì)胞J774A.1  

貨號(hào):QS-M030

細(xì)胞規(guī)格:1-3×10^6細(xì)胞量

庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨

培養(yǎng):DMEM+10% FBS

凍存條件:80%*培養(yǎng)液+10%FBS+10%DMSO

運(yùn)輸方式:常溫順豐運(yùn)輸和干冰順豐運(yùn)輸

貨 期:復(fù)蘇細(xì)胞需要1-2周,凍存細(xì)胞的需要3-5天(特殊情況會(huì)有說(shuō)明)

質(zhì) 控:無(wú)支原體、無(wú)污染、符合標(biāo)準(zhǔn)

研究范圍:僅供科研使用

特惠產(chǎn)品小鼠單核巨噬細(xì)胞J774A.1  

我司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品是國(guó)內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無(wú)外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無(wú)血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善,我們以飽滿(mǎn)的熱情歡迎新老客戶(hù)選購(gòu)!

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生物反應(yīng)器在生物制藥領(lǐng)域的研發(fā)和生產(chǎn)中大量應(yīng)用。但是哺乳動(dòng)物細(xì)胞對(duì)于周邊的環(huán)境非常敏感,較容易受到通氣,轉(zhuǎn)速,營(yíng)養(yǎng)成分及 pH 等多種因素的影響。在本文中,我們簡(jiǎn)單介紹了影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素之一—混合時(shí)間及其檢測(cè)衡量方法。

1.細(xì)胞培養(yǎng)平行性放大的簡(jiǎn)單原理

為了快速、穩(wěn)定的實(shí)現(xiàn)單抗、疫苗的工業(yè)化生產(chǎn),其中一部分工作在于對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行放大研究。這種研究可以幫助我們從搖瓶至 2000 L 乃至更大規(guī)模的生物反應(yīng)器培養(yǎng)過(guò)程中節(jié)省成本損耗及人力投入。相比于傳統(tǒng)發(fā)酵業(yè)使用的細(xì)菌而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞更為脆弱,更易受到流體運(yùn)動(dòng)及通氣的損傷。

因此,在大規(guī)模哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,除了*的使用較溫和、剪切力較低的攪拌槳代替?zhèn)鹘y(tǒng)的 Rushton 攪拌槳以外,很多用于衡量流體運(yùn)動(dòng)及通氣的模型也幫助大家較快速的實(shí)現(xiàn)從小規(guī)模至大規(guī)模哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化。

2. 混合時(shí)間

混合時(shí)間和攪拌槳的功耗被認(rèn)為是衡量攪拌槳及轉(zhuǎn)速的兩個(gè)維度。對(duì)于生物反應(yīng)器而言,流體的混合是一個(gè)非常重要的參數(shù),它衡量了反應(yīng)器是否能很好的給活細(xì)胞供給營(yíng)養(yǎng)成分和氧氣,同時(shí)對(duì)于剪切力敏感的哺乳動(dòng)物細(xì)胞,如果攪拌轉(zhuǎn)速過(guò)快又會(huì)造成很高的剪切力損傷導(dǎo)致細(xì)胞死亡或凋亡。所以如何在一定時(shí)間內(nèi)有效溫和的對(duì)流體進(jìn)行混合,從而提供給細(xì)胞一個(gè)舒適的環(huán)境,是衡量混合時(shí)間的意義。

簡(jiǎn)而言之,在放大過(guò)程中,如何保證混合時(shí)間在一定的范圍內(nèi),是平行性放大需要考慮的內(nèi)容之一。

混合時(shí)間(θm)指的是流體達(dá)到均一性所用的時(shí)間,是一個(gè)非常復(fù)雜的參數(shù),不僅與攪拌槳葉的設(shè)計(jì),槳葉及軸的傾斜角度,槳葉片數(shù),罐體的三維參數(shù)都息息相關(guān),同時(shí)也與實(shí)驗(yàn)參數(shù)息息相關(guān),如培養(yǎng)溫度、通氣情況、功耗等,因此(CFD)建模也經(jīng)常需要矯正存在誤差。所以目前更多的是采用混合時(shí)間的實(shí)際檢測(cè)方法驗(yàn)證 CFD 模型的優(yōu)劣,從而通過(guò)模型模擬大生物反應(yīng)器上細(xì)胞的運(yùn)行情況。

3.混合時(shí)間的檢測(cè)方法

3.1直接測(cè)量法

對(duì)反應(yīng)器特定條件的混合時(shí)間的測(cè)定可以通過(guò)測(cè)量液體體系中 pH,電導(dǎo),顏色,熒光,溫度的均一性來(lái)衡量。

假設(shè)用電導(dǎo)或 pH 來(lái)測(cè)量混合時(shí)間,整個(gè)測(cè)試條件一般用純水或緩沖液代替培養(yǎng)基來(lái)降低混合時(shí)間測(cè)量的成本,這種代替并不會(huì)影響混合時(shí)間的檢測(cè)。

混合時(shí)間的測(cè)量需要固定溫度,通氣和攪拌速率,并在反應(yīng)器的中部及下部插入相關(guān)電極,通過(guò)極短的時(shí)間向純水或緩沖液中加入強(qiáng)酸強(qiáng)堿或是強(qiáng)電導(dǎo)溶液(5M NaCl),觀(guān)察反應(yīng)器中部及下部電極的波動(dòng)情況,若波動(dòng)小于 95% 即意味著達(dá)到平衡

由于電極的擺放位置直接影響了檢測(cè)結(jié)果,所以可以在上中下多個(gè)部位插入多根電極,以求得到較準(zhǔn)確的混合時(shí)間數(shù)據(jù)。

這種檢測(cè)方法比較簡(jiǎn)單,但也會(huì)引入誤差,一是來(lái)源于電極的數(shù)據(jù)采集和接受的時(shí)間差,二是對(duì)于 pH 電極而言,離子擴(kuò)散需要時(shí)間因此也會(huì)引入一定的時(shí)間誤差。因此,相比于 pH 電極的混合時(shí)間檢測(cè)方法,電導(dǎo)的檢測(cè)方法會(huì)更為準(zhǔn)確,pH 電極會(huì)產(chǎn)生 5 - 50% 的高估混合時(shí)間的現(xiàn)象。同時(shí)由于混合時(shí)間一般都是在非通氣狀態(tài)下測(cè)試的,通氣也會(huì)加快或降低混合時(shí)間,會(huì)引起 ≤ 15% 的系統(tǒng)誤差。

3.2有色試劑法

同樣,我們可以通過(guò)有色試劑的混勻情況來(lái)衡量混合時(shí)間,如酚酞試劑在堿性環(huán)境中呈現(xiàn)紅色,當(dāng)過(guò)酸時(shí)即會(huì)顯現(xiàn)無(wú)色。顯色測(cè)量混合時(shí)間法需要用到呈像記錄儀來(lái)幫助我們更準(zhǔn)確的記錄數(shù)據(jù),呈像記錄儀記錄來(lái)自反應(yīng)器上方液體的顏色變化情況和時(shí)間。

4. 計(jì)算及模型

從小罐至大罐放大的過(guò)程中,假設(shè)僅通過(guò)計(jì)算來(lái)衡量罐體運(yùn)行參數(shù)和計(jì)算混合時(shí)間會(huì)與真實(shí)情況存在較大誤差,目前更多的會(huì)使用 CFD 模型模擬大罐運(yùn)行以期在真實(shí)生產(chǎn)中摸索出合適穩(wěn)定易行的運(yùn)行條件,混合時(shí)間就是衡量 CFD 模型建立是否能夠?qū)崿F(xiàn)小罐模擬大罐的標(biāo)準(zhǔn)之一。

當(dāng) Re > 10,000,流體的流動(dòng)狀態(tài)是紊流,現(xiàn)在已經(jīng)有很多已經(jīng)建立好的 CFD 模型可以直接使用;但由于大型生物反應(yīng)器中細(xì)胞對(duì)于剪切力的敏感性,轉(zhuǎn)速較低,因此大部分情況下,Re < 10,000,此時(shí)需要對(duì)目前已有的模型進(jìn)行修正后才可以使用。

在建模中,我們需要考慮的因素包括:攪拌槳直徑,罐體直徑,攪拌槳底部至罐體底部的距離,罐體高度,攪拌槳葉長(zhǎng)度,攪拌槳葉個(gè)數(shù),以及攪拌軸及攪拌槳葉各自的傾斜角度,如果有 2 個(gè)攪拌槳,2 個(gè)攪拌槳之間的距離也是建模的參數(shù)之一。

如果需要考慮通氣對(duì)于混合時(shí)間的影響,那么通氣孔徑及通氣量也需要放入建模體系中。目前市面上有不少相關(guān)建模軟件,此處暫不做推薦。

建模完成后,我們可以通過(guò)實(shí)際的混合時(shí)間與建模得到的混合時(shí)間進(jìn)行對(duì)比,誤差小于 5% (置信區(qū)間內(nèi)) 即認(rèn)為模型可以衡量大罐的運(yùn)行參數(shù)。

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