Sciencell平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基1101
品牌:Sciencell
英文名:Smooth Muscle Cell Medium (SMCM)
貨號(hào):1101
價(jià)格:¥2070.00
Sciencell平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基1101簡(jiǎn)介:
平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基是專門為正常人類平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計(jì)的適于其生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、激素、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(2%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進(jìn)正常人類平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長(zhǎng),并為其達(dá)到理想營(yíng)養(yǎng)平衡狀態(tài)。
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常見問題問答:
一、血清或培養(yǎng)基產(chǎn)生了顏色或沉淀的問題:
問:我用的是四季青的胎牛血清,56℃30分鐘滅活后出現(xiàn)了白色少量絮狀沉淀,是不是污染?還能不能 再用?血清的生產(chǎn)日期是2006年7月(現(xiàn)在是2007年6月11日)。
答:應(yīng)該問題不大。你可以取少量血清放入培養(yǎng)皿中,37℃過夜培養(yǎng)看看就知道是否污染了。血清中沉淀 物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)能否加血清?如果加了會(huì)有什么結(jié)果?為什么懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)就不能加血清?
答:血清是細(xì)胞培養(yǎng)基中重要的培養(yǎng)成份之一,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有廣泛影響。在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),我們通常會(huì)加入 10%的血清。血清的質(zhì)量對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的成功至關(guān)重要。一般說來,牛血清包括以下成分:生長(zhǎng)因子(如激素,白細(xì)胞介 素等),他們可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng);貼附因子,他們可以促進(jìn)細(xì)胞的貼壁,往往只有細(xì)胞貼壁才能增值(懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞 除外);蛋白質(zhì)(如血清白蛋白,球蛋白等),既可以作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),又可以中止胰酶的作用;還有很多成分不明的物 質(zhì)。血清還可以起到解毒作用,如脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性。血清還可以是細(xì)胞免受機(jī)械損傷。因此,無 論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞,血清是*的。除非因?qū)嶒?yàn)要求無血清培養(yǎng)時(shí),例如:為使細(xì)胞同步化時(shí),我們會(huì) 采用無血清培養(yǎng)的。單純的說懸浮細(xì)胞培養(yǎng)不能加血清就沒有太多的道理了。
三、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理:
答:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培 養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。
四、如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
答:我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作 :
(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃ 至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
(2)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(3)請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì) 因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(5)若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30 分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖 晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。