SKOV3細(xì)胞人卵巢癌細(xì)胞(含STR鑒定)
蘇州千舍生物,新增幾百株含STR鑒定細(xì)胞,來源明了,代數(shù)靠前,細(xì)胞狀態(tài)良好,采取順豐快遞運(yùn)輸,可以發(fā)復(fù)蘇和凍存細(xì)胞!
細(xì)胞名稱:SKOV3細(xì)胞人卵巢癌細(xì)胞
來源:人
細(xì)胞特性:貼壁
培養(yǎng)條件:90%1640+10%FBS
凍存條件:90%*培養(yǎng)液+10%DMSO
對于這些實(shí)驗(yàn)小白來說,養(yǎng)細(xì)胞肯定會遇到各種各樣的問題,那么,千舍生物給您指點(diǎn)一二:
如何判斷細(xì)胞污染了?
狀態(tài) 1: 細(xì)胞培養(yǎng)液變渾濁了,經(jīng)常見到是米湯樣,黃色液體,一般認(rèn)為細(xì)菌污染。
狀態(tài) 2:細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)含有能動的小黑點(diǎn),一般認(rèn)為是黑膠蟲。
狀態(tài) 3:胞培養(yǎng)基清亮,但是能看到飄在培養(yǎng)液帶有毛毛的白色的菌狀物質(zhì),有可能就是真菌感染。
策略:細(xì)胞污染了就直接扔了,還得把培養(yǎng)箱用酒精棉球擦干凈,并用紫外照射半小時(shí),防止再次污染。同時(shí)建議細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),在培養(yǎng)基中加入青鏈霉素 (尤其是初學(xué)者)
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞周圍包括細(xì)胞上有很多小黑點(diǎn),怎么辦?
策略 1:用胰酶消化下來后,低速短時(shí)間離心,不同實(shí)驗(yàn)室不一樣,如果平時(shí)是 1 000 轉(zhuǎn) 5 min 的話,就可以改為 700 轉(zhuǎn) 3 min,用新的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞收集是少一點(diǎn),但是一般都能干凈很多。多傳幾代就好多了。
策略 2:如果多次嘗試之后還是不干凈,就懷疑是否存在支原體污染了,用抗支原體藥就 OK 了。一般用上 3~5 天,細(xì)胞就干干凈凈了。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞表面沾了很多死細(xì)胞,傳代過程中一直存在怎么破?
有一招屢試不爽,那就是用 PBS 洗兩遍之后,加胰酶進(jìn)去,晃一晃,迅速將胰酶倒出,再用 PBS 洗一下,再加胰酶正常消化。死細(xì)胞由于粘附能力很弱,一次加胰酶進(jìn)去以后會掉下來,第二次加胰酶下來的細(xì)胞才是活性比較強(qiáng)的細(xì)胞。整完一次之后,再次傳代方法同上,一般 2~3 次之后,細(xì)胞就完好如初了。
全部提供STR鑒定
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SW1116 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
Caski 人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞/人宮頸癌上皮細(xì)胞
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HEC-1A 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
Ishikawa 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞
SKOV3細(xì)胞人卵巢癌細(xì)胞(含STR鑒定)細(xì)胞胞質(zhì)疏松,狀態(tài)不好,養(yǎng)不起來,怎么辦?
策略 1:一般情況下,從血清下手就行,要么換好血清,要么提高血清濃度,血清濃度提高到 15%~20% 培養(yǎng) 48 h,換成正常 10% 的濃度,用高濃度的血清培養(yǎng)時(shí)間過長對細(xì)胞有毒性。
策略 2:血清下手之后可以同時(shí)采取提高細(xì)胞密度的方法,從培養(yǎng)瓶換到六孔板,12 孔板等,細(xì)胞密度大,細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子多,腫瘤細(xì)胞通過旁分泌途徑促進(jìn)細(xì)胞生長。
預(yù)防策略:細(xì)胞胞質(zhì)疏松,老化的原因在于細(xì)胞傳代次數(shù)比較多,胰酶消化時(shí)間太長,這時(shí)候,一定要控制細(xì)胞傳代次數(shù),注意胰酶消化時(shí)間,胰酶消化時(shí)間過長,容易導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不佳以及胞質(zhì)疏松。有一招,元元沒試過,可以嘗試,將細(xì)胞凍起來,過段時(shí)間復(fù)蘇,細(xì)胞會長得比較好。
長途運(yùn)輸過來裝滿培養(yǎng)液的細(xì)胞如何處理?
很多人都會遇到從其他地方買來細(xì)胞或者快遞運(yùn)來細(xì)胞,裝滿培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶的細(xì)胞怎么處理的問題。
第 1 步:先放 37℃ 培養(yǎng)箱放置 4 小時(shí),這樣細(xì)胞在通過長途跋涉以后得以穩(wěn)定,觀察細(xì)胞狀態(tài)。
第 2 步:將新鮮培養(yǎng)基和舊的培養(yǎng)基 1:1 稀釋,如果細(xì)胞狀態(tài)不好,可以將血清濃度提到 15%,否則正常培養(yǎng),這樣有一個(gè)過渡期,不至于細(xì)胞換血清之后狀態(tài)不佳,15% 的血清培養(yǎng) 48 h 之后換成正常濃度培養(yǎng)。
千舍生物一站式購物平臺,涉及產(chǎn)品種類和貨號如下:
一、血清類: 涉及到的血清品牌:SERANA、GIBCO、Hyclone、BI、Bovogen、Gemini、美國NTC、biowest、PAN、SIGMA、康寧、PAA……涉及到血清分類:南美源、北美源、澳洲源、超低Igg、透析型、活性炭處理、高脂、低脂型等,另外還有無外泌體血清、科研用人混合血清、AB血清、馬血清、小牛血清、驢血清、雞血清、兔血清、大鼠血清等
二、細(xì)胞類: 400多株細(xì)胞,含STR鑒定及確切來源證明
三、常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)試劑類: Hyclone、Gibco培養(yǎng)基(液體、干粉)、雙抗、胰酶、PBS緩沖液、HAKATA細(xì)胞凍存液
四、酶免ELISA試劑盒(素爾生物自主研發(fā)DECO品牌):
可以提供免費(fèi)代測服務(wù)、 細(xì)胞因子檢測試劑盒、內(nèi)分泌檢測試劑盒、肌纖維話檢測試劑盒、肌梗賽檢測試劑盒、腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒、自身免疫檢測試劑盒、染病檢測試劑盒
五、ATCC 細(xì)胞或者培養(yǎng)基代購
六、歐美品牌試劑代購,只要您有貨號和品牌,我們都可以買得到!
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