QPK-101|TOYOBO試劑盒
貨號:QPK-101
品牌: TOYOBO
品名:Realtime PCR Master Mix
規格:1ml× 5支
目錄價:1,500
儲存溫度:-20℃
TOYOBO 日本東洋紡織株式會社距今已有120多年歷史,依靠世界*的纖維技術,開發出眾多高科技產品,并不斷向周邊領域拓展,內容涵蓋服裝、高機能樹脂、生物化學制品、
本產品是在Taq DNA polymerase基礎上開發的通用性很高的Realtime PCR用 2×濃度的預混液,已包含除引物、探針及樣品DNA以外的所有組分。經添加不同 的探針和引物后,可用于TaqMan® 檢測、Hybridization Probe檢測的Realtime PCR。 當然也可以用于普通PCR。
◆本產品特征◆ 1.高通用性 本產品適用于各種常見實時定量 PCR 儀: 1)產品中添加了BSA,能夠應用于Roche公司的LightCyclerTM以及其它使用 Glass Capillary的分析體系; 2)產品中還添加了Passive Reference(內含 1×濃度ROX reference dye), 可應用于Applied Biosystems公司的ABI PRISM® 實時定量PCR儀。經確認,使用其 它儀器的時候,即使不使用Passive Reference,也不會對實驗本身造成影響。 本說明書僅以 Applied Biosystems 公司的 ABI PRISM® 和 Roche 公司的 LightCyclerTM為例進行說明,供使用者參考。對于其他廠家的實時定量PCR儀,請 使用者根據儀器說明書,并結合實際情況進行適當調整。
2.快速熱啟動 為了抑制非特異性反應,本產品中添加了抗 Taq DNA 多聚酶的單克隆抗體進 行熱啟動。此方法的優點是酶活力的釋放極快,以往需要 10 分鐘以上的預變性 在 1 分鐘內即可完成,各循環的變性步驟只需考慮核酸的變性時間進行設定即可。 如果使用LightCyclerTM等高速PCR儀,則更能顯示出其縮短時間的*性。 <關于熒光Probe檢測體系> 以TaqMan® Probe為代表的熒光Probe檢測體系,是一種使用只有在與目的擴 增產物特異性混合(hybridize)時才會發熒光(或者消熒光)的特殊Probe的檢測 體系,與SYBR® Green I檢測體系相比,可進行特異性更高的檢測。 雖然無法檢測出非特異性擴增產物,但反應特異性較低的情況下,目的片段
3.的擴增反應會與非特異性擴增反應相競爭,造成目的片段的擴增效率低下。 [2] 本產品的組成 本產品分為兩個包裝,50μl 反應體系可用 40 次份(QPK-101T)和 200 次 份(QPK-101)。 Realtime PCR Master Mix 1 ml Realtime PCR Master Mix 1 ml x 5 該組分是包含反應緩沖液、dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶及抗DNA聚合酶抗 體的2×預混液。請添加探針、模板DNA和引物,并用滅菌蒸餾水配制成1×濃度 后再使用。該溶液中已包含1×濃度ROX(Passive reference dye)。
4.<注意> 本產品原則上在 -20℃以下避光冷凍保存。但是,如果在短期內需 持續使用時,可于融解后在4℃避光保存,此時長可保存 2個月。保 存時請使用避光箱或產品內配有的鋁箔袋。 5支裝的 QPK-101包裝內另外還添附有一個鋁箔袋,建議逐支融解 使用。融解后,于4℃狀態保存,并盡量在 3周內使用完畢 。融解后的 產品短期內不用時,請裝入原包裝袋,再次于 -20℃狀態下進行避光冷 凍保存。(本公司經實驗確認,反復凍融20次對產品質量沒有明顯影 響。)
為保證實驗效果,請在收到產品后的一年之內使用完畢。
本產品是在 Taq DNA polymerase 基礎上開發的通用性很高的Realtime PCR 用 2×濃度的預混液。可獲得重復性良好的結果。
各試劑分別按以下所示進行使用。
產品名 | 用途 | 是否有passive reference校正 | 是否可用于玻璃毛細管 | 能否用于一步法RT-PCR* | 可靠性 |
Realtime PCR Master Mix | 探針法** | 有 | 可 | 可 | ☆☆☆ |
SYBR® Green Realtime PCR Master Mix | SYBR®Green法 | 有 | 可 | 可 | ☆☆☆ |
SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus- | SYBR®Green法 | 有 | 可 | 不可 | ☆☆☆☆ |
*逆轉錄酶「ReverTra Ace®」[Code No. TRT-101]與RNase inhibitor [Code No. SIN-201] 組合,就可以進行one-step PCR。
**可用于TaqMan® probe分析法及Hybridization probe分析法等。
特征
高特異性
為了抑制非特異性反應,本產品采用了抗Taq聚合酶抗體的熱啟動法。
適用于各種用途
可用于探針分析法及SYBR® Green I分析法。
適用于各類儀器
產品中還添加了 Passive Reference,可應用于需要校正的儀器(Applied Biosystems®、StepOnePlusTM等)。
還可用于使用玻璃毛細管類型的檢測儀器(Roche Diagnostics公司的LightCycler®等)。
提高了可靠性 [SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-(QPK-212)]
通過對組分的優化,抑制了SYBR® Green 分析時引物二聚體等問題的產生,提高了可靠性和重復性。
使用了高純度Taq DNA polymerase
PCR的基本性能得到了改善。
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