產(chǎn)品名稱:人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 (含STR鑒定)
細(xì)胞代碼:WERI-RB-1
培養(yǎng)條件:IMDM+15%FBS+L-谷氨酰胺+1%P/S
生長狀態(tài):懸浮生長(圓形細(xì)胞聚集成葡萄狀)
03、細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)能否更換胎牛血清?
首先要確定更換胎牛血清的理由,如果細(xì)胞培養(yǎng)無異常的話,不建議隨意更換不同品牌和來源的胎牛血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的來源(血源地)和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同地域和等級的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞死亡。
如果是使用的胎牛血清出現(xiàn)了問題,比如保存不當(dāng)或操作不當(dāng)導(dǎo)致血清成分析出、混濁、污染等情況,可以優(yōu)先更換同品牌、等級、批次的血清;如果是產(chǎn)品質(zhì)量問題更換血清品牌的話,需要用一批細(xì)胞進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)才行,以保證細(xì)胞能夠正常培養(yǎng)。
另外在購買胎牛血清的時(shí)候要選擇正規(guī)來源和經(jīng)過海關(guān)檢疫胎牛血清,非正規(guī)來源的胎牛血清有很多安全隱患,對實(shí)驗(yàn)室、操作人員、細(xì)胞培養(yǎng)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)都有很大的影響。
04、一般在拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
收到細(xì)胞后先不要開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議對收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況一般可以再申請免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制。
05、培養(yǎng)細(xì)胞什么時(shí)候需要換液?
視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。
06、培養(yǎng)基到底要不要加抗生素?
除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。如果是沒有進(jìn)行過細(xì)胞培養(yǎng)的新手,對無菌技術(shù)沒有信心的,或者提取的原代細(xì)胞,怕污染的,可以適量添加抗生素。抗生素本身也是有毒性的,有些抗生素的藥效濃度水平與毒效濃度水平非常接近,對細(xì)胞多少有傷害。
07、培養(yǎng)箱二氧化碳使用比例如何判定?
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時(shí),則應(yīng)使用5CO2培養(yǎng)細(xì)胞。
小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 AML-12
小鼠氣道平滑肌細(xì)胞 ASMC
小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞 G422
小鼠精原細(xì)胞系 GC-1 spg
小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞 MAEC
小鼠骨樣細(xì)胞 MLO-Y4
小鼠肺上皮細(xì)胞 MLE-12
小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細(xì)胞 IMCD3
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-L1
小鼠乳腺癌細(xì)胞 4T1
小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 4T1+luc
小鼠巨噬細(xì)胞 Ana-1
小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16
小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16-F10
小鼠黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 B16-F10+LUC
小鼠原B細(xì)胞株 BAF3
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 BALB/3T3 clone A31
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 bEnd.3
小鼠胰島素瘤胰島Beta細(xì)胞 Beta-TC-6
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 BV2
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 C17.2
小鼠成肌細(xì)胞 C2C12
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 C3H/10T1/2 Clone8
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 CT26
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 CT26+LUC
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 CT26.WT
小鼠胚胎干細(xì)胞 E14
小鼠淋巴瘤細(xì)胞 EL-4
小鼠乳腺癌細(xì)胞 EMT6
小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤 GL-261
小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤熒光素酶標(biāo)記 GL-261+luc
小鼠乳腺上皮細(xì)胞 HC11
小鼠肝癌細(xì)胞 HEPA1-6
小鼠肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HEPA1-6+LUC
小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 HT22
小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞 ID8
小鼠單核巨噬細(xì)胞 J774A.1
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞 K7M2WT (K7M2-wt)
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC
小鼠肺癌細(xì)胞 LLC
小鼠肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 LLC+LUC
小鼠淋巴瘤細(xì)胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)
小鼠成纖維細(xì)胞 L929
小鼠胰腺癌細(xì)胞 LTPA
小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 MA-891
小鼠膀胱癌細(xì)胞 MB49
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 MC38
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MC38+LUC
小鼠胚胎成骨細(xì)胞 MC3T3-E1
小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14 MC3T3-E1subclone 14
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 MEF
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 MEF(霉素C處理)
小鼠前胃癌細(xì)胞 MFC
小鼠正常肝細(xì)胞 NCTC1469(NCTC CLONE 1469)
小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 neuro-2a
小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 OP9
小鼠雜交瘤(抗CD2)細(xì)胞 OKT11
小鼠畸胎瘤細(xì)胞 P19
小鼠白血病細(xì)胞 P388
小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 P815
小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系 PT-67
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 RAW 264.7
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 RGC-5
小鼠前列腺癌細(xì)胞 RM-1
小鼠雜交瘤 SDOW-17
小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Sp2/0
小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Sp2/0-Ag14
小鼠小腸內(nèi)分泌細(xì)胞 STC-1
小鼠腎小球系膜細(xì)胞 SV40-MES-13
小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞 SVEC4-10
小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 TM3
08、L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?
L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時(shí)間后會降解,但是確切的降解率一直沒有最終定論。L-谷氨酰胺的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對于一些細(xì)胞具有毒性。
09、培養(yǎng)基里的粉紅色是什么?
酚紅一般作為培養(yǎng)基中pH值的指標(biāo):當(dāng)培養(yǎng)基呈中性時(shí)為紅色,呈酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。另外,酚紅可以模擬類固醇激素(特別是雌激素)的作用。如果要避免類固醇反應(yīng),可以在無酚紅的培養(yǎng)基里進(jìn)行培養(yǎng)。
10、胰酶里EDTA的作用?
二價(jià)的離子會抑制胰酶活性,所以加入EDTA可以螯合掉Ca、Mg這樣的二價(jià)離子。胰酶也要注意不要反復(fù)凍融。
11、如何避免細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染?
主要還是考慮無菌環(huán)境,盡量做好操作臺的滅菌,別把培養(yǎng)基滴落在生物安全柜的入風(fēng)口,別在培養(yǎng)箱里把培養(yǎng)基打翻。這兩個地方霉菌一旦滋生,那你就只能等著用甲醛熏蒸了。
紫外無法殺滅霉菌,酒精也不行,只能用甲醛熏蒸,但是一定要注意安全。復(fù)蘇的時(shí)候,水浴鍋也需要進(jìn)行滅菌處理。一旦出現(xiàn)污染,不要急,能救的就用抗生素救一下,但是一般情況下,選擇扔掉。避免交叉感染,要不只能整個實(shí)驗(yàn)室消毒了。
人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 (含STR鑒定) |細(xì)胞培養(yǎng)|細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清|細(xì)胞培養(yǎng)方法|細(xì)胞黑點(diǎn)問問題........