Mahlavu 人肝癌細胞
細胞特性
1) 來源:人 肝組織
2) 形態:上皮細胞樣 貼壁生長
3) 含量:>1x10^6 細胞數
4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
運輸和保存:干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完quan培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完quan培養基來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備DMEM 培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 凍存細胞的復蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完quan培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完quan培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完quan培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白mei-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完quan培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
下面T25瓶為例;
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。
人多發性骨髓瘤細胞 MM.1R
人多發性骨髓瘤細胞 MM.1S
人急性淋巴母細胞白血病細胞 MOLT-4
人胚肺成纖維細胞 MRC-5(有限細胞系)
人急性淋巴母細胞白血病細胞 MT-4
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞 MUM2B
人前B急性淋巴細胞白血病細胞 NALM-6
人畸胎癌細胞 NCCIT
人非小細胞肺癌細胞 NCI-H1299
人肺腺癌細胞 NCI-H1395
人肺癌細胞 NCI-H1437
人非小細胞肺腺癌細胞 NCI-H157
人肺支氣管癌細胞 NCI-H1650[H1650](MKN-1)
人肺癌細胞 NCI-H1703
人肺癌細胞 NCI-H1944
人肺腺癌細胞 NCI-H1975
人肺癌細胞 NCI-H2126
人肺鱗癌細胞 NCI-H226
人肺癌細胞 NCI-H23
人肺癌細胞(淋巴結轉移) NCI-H292
人腎上腺皮質細腺癌細胞 NCI-H295R
人非小細胞肺癌細胞 NCI-H358
人小細胞肺癌細胞 NCI-H446
人大細胞肺癌細胞 NCI-H460 [H460]
人大細胞肺癌細胞 NCI-H661[h661]
人胃癌細胞 NCI-N87
人胃癌細胞熒光素酶標記 NCI-N87+LUC
人膽囊癌細胞 NOZ
人腎癌細胞 OS-RC-2
人卵巢腺癌細胞 OVCAR-3
人結直腸癌細胞 P53R [JHU-56]
人胰腺癌細胞 Panc 03.27
人胰腺癌上皮細胞 Panc 05.04
人胰腺癌細胞 PANC-1
人胰腺癌細胞吉西他濱耐藥株 PANC-1/GEM
人胰腺癌細胞 PANC10.05
人胰腺癌細胞 PATU8988t(PATU8988)
人胰腺癌細胞 PATU8988S
人前列腺癌 PC-3
人肺癌細胞 pc-9
人胰腺導管腺癌細胞 PL45
人肝癌細胞 PLC/PRF/5
人胚腎細胞 ProPakA.6
人正常肝細胞 QSG-7701
人淋巴瘤細胞 Raji
人B淋巴瘤細胞 RAMOS RA1
人肝膽管癌細胞 RBE
人橫紋肌肉瘤細胞 RD
人急性非B非T淋巴細胞白血病細胞 REH
人子宮內膜癌細胞 RL95-2
人多發性骨髓瘤細胞 RPMI8226
人結腸腺癌細胞 RKO
人膀胱移行細胞乳頭瘤 RT4
人前列腺正常細胞 RWPE-1
人前列腺正常細胞 RWPE-2
人小細胞肺癌 SBC-2
人膀胱鱗癌細胞 SCaBER
人神經母細胞瘤細胞 sh-sy5y
人神經母細胞瘤細胞 sh-sy5y轉染突變型
人神經母細胞瘤細胞 sh-sy5y轉染野生型
人子宮頸鱗癌細胞 SIHa
人乳腺癌細胞 SK-BR-3
人乳腺癌細胞 SK-BR-3+IUC
人肝腹水腺癌細胞 SK-HEP-1
人低分化肺腺癌細胞 SK-LU-1
人皮膚黑色素瘤細胞 SK-MEL-2
人皮膚黑色素瘤細胞熒光素酶標記 SK-MEL-2+LUC
人肺鱗癌細胞 SK-MES-1
人神經上皮瘤細胞 SK-N-MC
人腎母細胞瘤細胞 SK-NEP-1
人神經母細胞瘤細胞 SK-N-SH
人卵巢癌細胞 SK-OV-3
人卵巢癌細胞熒光素酶標記 SK-OV-3+LUC
人肝癌細胞 smmc-7721
人腦膠質瘤 SNB-19
人肝癌細胞 snu-1
人肝癌細胞 Snu-182
人膀胱上皮永生化細胞 sv-huc-1
人滑膜肉瘤細胞 SW982 [SW-982]
人結腸腺癌細胞 SW1116
人腎上腺皮質小細胞癌細胞 SW-13
人腎上腺皮質小細胞癌細胞 SW1353
人胰腺癌細胞 SW1990
人結腸腺癌細胞 SW480
人甲狀腺癌細胞 SW579
人結直腸腺癌細胞 SW620
人結直腸腺癌細胞+GFP SW620+GFP
142140210 SW620/5FU
人膀胱移行細胞癌 SW780
人膀胱移行細胞癌細胞 T24
人乳腺導管癌細胞 T47D
人膠質母細胞瘤 T98G
人食管癌細胞 TE-1
人食管癌細胞 TE-12
人單核細胞白血病細胞 thp-1
人腦膠質瘤 TJ905
人乳頭狀甲狀腺癌細胞株 TPC-1
人甲狀腺癌細胞 TT
人喉癌細胞 TU212
人喉癌細胞 TU-138
人腦星形膠質母細胞瘤 U118MG(U-118MG)
人成骨肉瘤細胞 U-2 OS
人類星形膠質細胞瘤細胞 U251 MG (KO)
人骨髓瘤細胞 U266
人腦星形膠質母細胞瘤 U87MG
人腦星形膠質母細胞瘤+RFP U87MG+RFP
人淋巴瘤細胞 U-937
人膀胱移行細胞癌 UM-UC-3
人前列腺癌細胞 VCAP
人視網膜神經膠質瘤細胞 WERI-RB-1
人黑素瘤細胞 WM-115
人正常前列腺基質永生化細胞 WPMY-1
人正常肝細胞 WRL68
云南宣威人肺腺癌細胞系+GFP XWLC-05+GFP
人膽囊癌細胞系 ZJU-0430
人膽囊癌細胞系熒光素酶標記 ZJU-0430+LUC
人乳腺癌細胞 ZR-75-1
Mahlavu 人肝癌細胞
豬腎細胞系 LLC-PK-1 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長
豬腎細胞系 PK-13 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長
豬鼻甲黏膜成纖維細胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長
豬髖動脈內皮細胞 PIEC 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長