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生物實驗中瓊脂粉常見問題解答
問題1:使用瓊脂粉配置的MS培養基顏色明顯變黃?影響實驗?
產品批次不一樣,有些批次的瓊脂粉就是顯黃色,不是質量問題,不影響使用。
進口產品也有直接指出瓊脂粉是黃色為正常現象。
問題2:凝膠強度?
答:凝膠強度(1.5%)≥
1.5g瓊脂粉溶于100ml水,溶解凝固后要放置20℃恒溫箱中靜置10小時以上,再測定凝膠強度。與溫度,水質等有關。
一般瓊脂粉和卡拉膠,夏季使用濃度要比冬季偏高。夏季溫度高,保存時間久,可能會有部分降解,所以要達到同樣凝膠強度的用量就偏高。
問題3:瓊脂粉不凝固
1、培養基PH值過低 ,偏酸,水解
2、所加瓊脂量不夠 ,增加用量。攪拌不均勻,倒板前沒有充分搖勻,凝固不均勻。
3、瓊脂質量不過關,瓊脂條在使用時添加量要稍微高一點,瓊脂粉是不是新買的4、滅菌溫度過高,加熱時間過長。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度5、培養基沒有加熱溶解夠不夠,就沒有凝固。是不是瓊脂加錯了,營養瓊脂不會凝固。
到平板時可以推薦在超凈臺內吹干晾干,蒸發過多水分。
問題4:PH與瓊脂粉?
瓊脂粉默認使用PH為中性,一般為7左右,PH小于4則無法凝結,具體的PH與穩定性的檢測沒有做過,根據經驗來說 PH偏堿,凝膠后顏色稍白,PH偏酸,凝膠顏色稍暗。
問題5:瓊脂粉做碳源測試,不加碳源細菌仍然能生長,上一批次的就不能生長?
答:理論上應該不長,一般微生物都不能利用瓊脂粉,但某些雜菌仍可以利用,所以要檢測到底是瓊脂粉純度問題還是染了雜菌。
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