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類胡蘿卜素(Carotenoid)檢測試劑盒(微板法)

時間:2024/1/2閱讀:107
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類胡蘿卜素(Carotenoid)檢測試劑盒(微板法

產品貨號:BA1645

 

產品規(guī)格:100T

 

產品簡介:

葉綠體是光合作用的細胞器,在光合作用研究中,常需要用提取的葉綠體展開下游研究工作。葉綠體中所含的色素主要有兩大類,葉綠素(包括葉綠素a和葉綠素b)和類胡蘿卜素(包括胡蘿卜素和葉黃素),它們與類囊體膜上的蛋白質結合,成為色素蛋白復合體,其中葉綠素又稱葉綠體色素(Chlorophyll)。類胡蘿卜素是一種脂溶性且具有營養(yǎng)特性的化合物,給植物和動物提供天然色素,是重要的抗氧化劑,并有能力轉換為必需維生素。類胡蘿卜素可預防細胞,組織和基因損毀,增強身體免疫系統,抵御感染,減少癌癥風險,保護心臟。

類胡蘿卜素(Carotenoid)檢測試劑盒(微板法)檢測原理是類胡蘿卜素不溶解于水,而溶于有機溶劑,以有機溶劑粗提類胡蘿卜素,根據朗伯-比爾定律,某有色溶液的吸光度(A)與其中溶質濃度(C)和液層厚度(L)成正比,即 A=αCL,其中α為比例常數,當溶液濃度以百分比濃度為單位,層液厚度為1cm時,α為該物質的吸光系數。在本試劑盒情況下,葉綠素a、葉綠素b、類胡蘿卜素在665nm 649nm470nm處有最大吸收波,根據經驗公式可計算出葉綠素a、葉綠素b、總葉綠素、類胡蘿卜素含量。該試劑盒主要用于植物組織中葉綠素、類胡蘿卜素的提取以及以分光光度計定量檢測葉綠素a、葉綠素b、總葉綠素、類胡蘿卜素含量。該試劑僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

 

產品組成:

產品名稱

100T

保存條件

試劑(A): Carotenoid Assay buffer

2×530ml

室溫

試劑(B): 提取粉劑

6g

室溫

 

自備材料:

1. 研缽或勻漿器

2. 離心管

3. 濾紙或紗布

4. 96孔板酶標儀

 

操作步驟 (僅供參考)

1. 類胡蘿卜素提取:

取菠菜或其他植物新鮮葉片,洗凈,擦干,去中脈,稱取剪碎的新鮮樣品0.1g,置于研缽或勻漿器,加入少量提取粉劑(50mg)1ml Carotenoid Assay buffer,研磨或勻漿成液態(tài)。

將研磨液或勻漿液轉移至10ml離心管,用少量Carotenoid Assay buffer沖洗研缽或勻漿器數次,最后連殘渣一同倒入10ml離心管,補加Carotenoid Assay buffer10ml,混勻,避光放置5min-2h

(注:也可將組織剪碎,加入Carotenoid Assay buffer,避光放置12~36h,期間晃動數次,使組織與提取試劑充分接觸,當組織接近白色,即表示色素提取完成,可直接進行測定

2. 觀察底部組織殘渣接近于白色,即為提取,如果仍有較多組織顏色,應再加入Carotenoid Assay buffer繼續(xù)避光放置。

3. 濾紙或三層紗布過濾,留取濾液,即為類胡蘿卜素粗提液。

4. Carotenoid測定:取類胡蘿卜素粗提液加入96孔板,以Carotenoid Assay buffer調零,酶標儀測定粗提液在665nm649nm470nm處吸光度(A665A649A470)

 

算:

葉綠素a含量(mg/g)=Ca×V×N/(W×1000)

葉綠素b含量(mg/g)=Cb×V×N/(W×1000)

總葉綠素含量(mg/g)=CT ×V×N/(W×1000)

類胡蘿卜素含量(mg/g)=CC×V×N/(W×1000)

式中:Ca=13.95×A665-6.88×A649(mg/L)

Cb=24.96×A649-7.32×A665(mg/L)

CT=6.63×A665+18.08×A649(mg/L)

CC=(1000×A470-2.05×Ca -114.8×Cb)/245(mg/L)

=(1000×A470-2851.304×A649+811.7385×A665)/245(mg/L)

V=類胡蘿卜素粗提液體積(ml)=10(ml)

N=稀釋倍數

W=樣品鮮重或干重(g)

1000=mlL的單位換算

 

注意事項:

1. 為避免葉綠素和類胡蘿卜見光分解,操作時應盡量避光,研磨或勻漿時應盡量縮短時間。

2. 測定吸光度值大于1時,可適當稀釋后再行測定。

3. Carotenoid Assay buffer易揮發(fā),不用時需擰緊瓶蓋。

4. 色素粗提液不能出現渾濁現象,否則應重新過濾。

5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期:12個月有效。


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