Saint-ZTS-8——細胞實時定量檢測試劑

產品貨號:ST1010

產品簡介：

Saint-ZTS-8細胞實時定量檢測試劑根據專有配方配制，加入培養板/皿后可長時間(1-6天)用于定量檢測細胞增殖能力。

Saint-ZTS-8細胞實時定量檢測試劑能夠可逆性的與細胞內的脫氫酶反應，剪切后生成具有紅色發光基團的無毒化合物（化合物的生成量與活細胞的數量和活力成正比），可用于長時間的細胞增殖和毒性分析，方法簡便而準確。

試劑優點：

1. 結果準確，重現性好  試劑不影響細胞活力，顯色產物直接溶解于培養液，直接測定OD值或熒光強度即可準確反應細胞活力。

2. 操作省時簡單  試劑即開即用，無需配制；只需一步操作，即可測定。

3. 安全性好  不含放射性同位素和有害有機溶劑，使用安全。

4. 靈敏度高  靈敏度高于MTT、XTT、CCK8等終點法試劑。

5. 可長時間實時檢測  加入細胞后可于1-6天內隨時檢測。

使用方法：

1. 使用96孔板，細胞培養和處理完畢。

2. 迅速加入Saint-ZTS-8試劑，每孔10μl。

3. 培養板放回培養箱，37℃孵育1~4小時。

4. 于570nm處測定OD值；或于酶標儀底讀Ex=490/20nm、Em=560/20nm處檢測熒光強度。

5. 結果分析  

光吸收檢測：將各測試孔的OD值減去對照孔或調零孔OD值。各平行孔的OD值取平均數。

細胞活力% = （加藥細胞OD570nm-空白OD570nm）/（對照細胞OD570nm -空白OD570nm）×100%

熒光法檢測：將各測試孔的熒光強度減去對照孔或調零孔熒光強度。各平行孔的熒光強度取平均數。

細胞活力% = （加藥細胞熒光強度-空白熒光強度）/（對照細胞熒光強度 - 空白熒光強度）×100%

6. 第一次檢測后可放回培養箱繼續培養1-6天，中間可按實驗需求隨時取出重新讀板檢測。

7. 若使用96孔外的培養板，試劑用量隨培養基體積等比例增減。

注意事項：

1. 使用時，建議先做幾個孔摸索條件，考察接種細胞的數量和加入Saint-ZTS-8試劑后的培養時間。

2. 加入試劑速度要快，以避免試劑殘留和加樣速度不一所致反應時間不同造成的顯色誤差。有條件的情況下，建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。為避免槍頭上的殘留所帶來的加樣誤差，Saint-ZTS-8試劑可在加樣前用培養基稀釋混勻。

3. 試劑加入后輕輕振搖培養板，使Saint-ZTS-8試劑與培養基充分混勻。

4. 試劑加入后培養時間根據細胞種類的不同和每孔細胞數量的多少而異。對于貼壁細胞，加入Saint-ZTS-8的培養時間一般為1~4小時，但在培養30分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度（根據細胞種類而定）。與貼壁細胞相比，懸浮細胞較難顯色。對于懸浮細胞，在加入Saint-ZTS-8培養1~4小時后，可先從培養箱中取出，目測染色程度或用酶標儀測定決定。白細胞較難顯色，因此需要較長的Saint-ZTS-8反應時間或增加細胞數量（~10⁵個細胞/孔）。若顯色困難，可以將培養板放回培養箱，繼續培養數小時后再確定。注意：Saint-ZTS-8試劑的最佳反應時間以具體顯色的最佳時間為準。

5. Saint-ZTS-8試劑中的發色化合物會與熒光猝滅劑反應，如果實驗中有熒光猝滅劑，需要檢查背景值，即在不含細胞的培養基中加入藥物，然后加入Saint-ZTS-8試劑在一定時間內檢測，和不加藥物的培養基進行比較（只加Saint-ZTS-8試劑），如果讀取結果OD值明顯偏低，則說明有反應。

6. 若細胞培養時間較長導致培養基顏色或pH發生變化，建議更換新鮮培養基后再加入Saint-ZTS-8試劑。含有酚紅的培養基不影響本試劑的使用。

7. 如果要測定細胞的具體數量，需要先做一個標準曲線。

8. 若測得值過高，可酌減鋪板細胞數或Saint-ZTS-8試劑用量。

9. 每孔加入10μL Saint-ZTS-8試劑。如果起始的培養體積為200μL，則需加入20μL Saint-ZTS-8試劑，其它情況以此類推。可以用加了相應量細胞培養液和Saint-ZTS-8試劑但沒有加入細胞的孔作為空白對照。如果擔心所使用的藥物會干擾檢測，需設置加了相應量細胞培養液、藥物和Saint-ZTS-8試劑但沒有加入細胞的孔作為空白對照。

試劑包裝：

100次：1ml×1管；500次：5ml×1瓶。

貯藏條件：

Saint-ZTS-8試劑在避光0~5℃的條件下存放半年，測定效果不變。在-20℃的條件下可以貯存更久。反復凍融會增加背景值，經常使用時請于0~5℃條件下保存。

本產品僅供科研使用。