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DNase Ⅰ(蛋白提取用)
產(chǎn)品貨號:T11190
產(chǎn)品規(guī)格:10KU
產(chǎn)品簡介:
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一種非特異性核酸酶切酶,可用于降解單鏈或雙鏈DNA,其原理為DNaseⅠ水解磷酸二酯鍵產(chǎn)生帶有5'-磷酸基團(tuán)和3'-OH的單核苷酸或寡核苷酸。本產(chǎn)品能迅速水解核酸,降低粘度以減少處理時間和增加蛋白產(chǎn)量。該酶可以與細(xì)菌蛋白提取液和RIPA裂解液等蛋白抽提試劑配合使用。
本產(chǎn)品RNase活性未檢測,不能用于反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(RT-PCR)中DNA的去除使用。RT-PCR中DNA污染的去除請選擇RNase-free DNase I。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
DNase I粉末 | 10 KU | -20℃ |
DNase I溶解液 | 5ml | -20℃ |
1M MgCl2 | 5ml | -20℃ |
活性定義:
One unit of the enzyme completely degrades 1μg of DNA in 10 min at37°C.
DNaseI溶解液組份:
20mM sodium acetate pH 6.5, containing 5mM CaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol.
DNaseI失活或抑制:
加入EDTA至終濃度為2.5mM后,65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑,達(dá)到毫摩爾/升濃度的鋅離子,0.1%的SDS,DTT、巰基乙醇等還原劑,50-100mM以上鹽濃度均對DNase I有顯著抑制作用。
使用方法:
1. DNase I溶液的配制:取5ml DNase I溶解液全部加到DNase I粉末中,充分混勻,配成濃度為2000U/ml DNase I溶液。-20℃貯存。
2. 蛋白提取液中按照1/100體積加入DNase I溶液(使其終濃度為20U/ml),1/100體積加入1MMgCl2,37℃處理30-60分鐘。
注:由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否則會降低DNase的消化能力。
3. 繼續(xù)后續(xù)蛋白提取實驗。
保存:-20℃粉末未配制有效期3年;DNaseI配制成溶液后-20℃有效期一年。
DNase Ⅰ(蛋白提取用)
產(chǎn)品貨號:T11190
產(chǎn)品規(guī)格:10KU
產(chǎn)品簡介:
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一種非特異性核酸酶切酶,可用于降解單鏈或雙鏈DNA,其原理為DNaseⅠ水解磷酸二酯鍵產(chǎn)生帶有5'-磷酸基團(tuán)和3'-OH的單核苷酸或寡核苷酸。本產(chǎn)品能迅速水解核酸,降低粘度以減少處理時間和增加蛋白產(chǎn)量。該酶可以與細(xì)菌蛋白提取液和RIPA裂解液等蛋白抽提試劑配合使用。
本產(chǎn)品RNase活性未檢測,不能用于反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(RT-PCR)中DNA的去除使用。RT-PCR中DNA污染的去除請選擇RNase-free DNase I。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
DNase I粉末 | 10 KU | -20℃ |
DNase I溶解液 | 5ml | -20℃ |
1M MgCl2 | 5ml | -20℃ |
活性定義:
One unit of the enzyme completely degrades 1μg of DNA in 10 min at37°C.
DNaseI溶解液組份:
20mM sodium acetate pH 6.5, containing 5mM CaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol.
DNaseI失活或抑制:
加入EDTA至終濃度為2.5mM后,65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑,達(dá)到毫摩爾/升濃度的鋅離子,0.1%的SDS,DTT、巰基乙醇等還原劑,50-100mM以上鹽濃度均對DNase I有顯著抑制作用。
使用方法:
1. DNase I溶液的配制:取5ml DNase I溶解液全部加到DNase I粉末中,充分混勻,配成濃度為2000U/ml DNase I溶液。-20℃貯存。
2. 蛋白提取液中按照1/100體積加入DNase I溶液(使其終濃度為20U/ml),1/100體積加入1MMgCl2,37℃處理30-60分鐘。
注:由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否則會降低DNase的消化能力。
3. 繼續(xù)后續(xù)蛋白提取實驗。
保存:-20℃粉末未配制有效期3年;DNaseI配制成溶液后-20℃有效期一年。
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