乳酸檢測試劑盒（乳酸脫氫酶比色法）

產品貨號：BA1698

產品規格：50T

產品簡介：

乳酸(Lactic acid，LD)又稱2-羥基丙酸是一種化合物，是一種含有羥基的羧酸，分子式是C₃H₆O₃，參與生物化學很多反應過程。乳酸檢測有化學氧化法、酶催化法、電化學法、酶電極感應器法。其中，酶催化法是使用乳酸脫氫酶(LDH)催化乳酸氧化，生成丙酮酸和NADH，通過分光光度法或熒光光度法測定NADH的生成量，進而計算出乳酸含量。

乳酸檢測試劑盒(乳酸脫氫酶比色法)其檢測原理是在NAD存在條件下，乳酸脫氫酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸，同時生成NADH。在堿性條件下顯色劑與丙酮酸生成復合物，并使平衡偏向乳酸氧化為丙酮酸的方向，驅動反應完成，生成的NADH與乳酸為等量摩爾。通過分光光度比色法測定340nm處吸光度，據此通過比色分析就可以計算出LD水平。該試劑盒可用于檢測細胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清等樣品中內源性的乳酸含量。該試劑盒僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產品組成：

需自備的儀器和用品：

離心管或小試管、蒸餾水、水浴鍋或恒溫箱、比色杯、分光光度計。

操作步驟：

1. 準備樣品：

血漿、血清、尿液及其他體液樣品：血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定，尿液通常也可以直接用于測定，-20℃凍存。

細胞或組織樣品：取恰當細胞或組織裂解液，如果有必要需進行適當勻漿，低速離心取上清，-20℃凍存，用于LD的檢測。

高濃度樣品：如果樣品中含有較高濃度的LD，可以使用原有的裂解液或PBS等進行稀釋，如雞血清、血漿可稀釋5～10倍后檢測。

2. 配制標準品工作液：取乳酸標準(20mmol/L)0.1ml溶解于0.3ml乳酸標準稀釋液，使濃度達到5mmol/L，即為標準品工作液-乳酸標準(5mmol/L)。4℃避光保存2個月有效。

3. LD檢測：按照下表設置空白管、對照管、標準管、測定管，溶液應按照順序依次加入，并注意避免產生氣

泡。如果樣品中的LD濃度過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測最好能設置平行管。

4. 用分光光度計檢測，以蒸餾水調零，比色杯光徑1.0cm，讀取空白管、對照管、標準管、測定管的340nm吸光度(即A_空白、A_對照、A_標準、A_測定)，一般應數小時內檢測完畢。 

計算結果： 

血清、血漿、尿液、腦脊液乳酸(mmol/L)=｛(A_測定?A_對照)/(A_標準?A_空白)｝×5

組織乳酸(mmol/g)=｛(A_測定?A_對照)/(A_標準?A_空白)｝×5/待測樣品蛋白濃度(g/L)

式中：A_測定=測定管的吸光度值

A_對照=對照管的吸光度值

A_標準=標準管的吸光度值

A_空白=空白管的吸光度值

參考區間： 

健康成年人安靜狀態空腹靜脈血      0.6～2.2mmol/L

健康成年人安靜狀態空腹動脈血      0.3～1.47mmol/L

健康成年人尿液乳酸排出量       5.5～22mmol/d

新生兒毛細血管血                  1.2～4.4mmol/L

0～16 兒童腦脊液                  1.1～2.8mmol/L

注意事項：

1. 本法適用于自動分析儀，分別監測測定管和標準管的吸光度升高速率，計算乳酸的濃度。

2. 如果沒有分光光度計，也可以使用酶標儀測定。

3. 抗凝劑用肝素鈉-氟化鈉較好。抗凝血樣品置于冰浴中送檢，盡快分離出血漿等。

4. 草酸抗凝劑對LDH有一定的抑制作用。

5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：6個月有效。