19126518388
當前位置：深圳市安培生物科技有限公司>>技術文章>>qPCR實驗為什么要制作熔解曲線？
熒光DNA結合染料法的缺點是它們能在反應中結合所有DNA雙鏈，包括在實時熒光PCR中產生的引物二聚體，和其他非特異性產物，引起大量的背景噪聲信號。
這種噪聲會影響我們對靶基因產量的評估，甚至熒光強度和靶基因的起始量、全長根本沒什么關系。
因此，我們使用熒光DNA染料結合法時，需要對擴增產物進行熔解曲線的分析。通過對擴增反應產物逐漸升溫，同時監測每一步的熒光信號來制作熔解曲線。
熔解曲線的縱坐標是熒光信號值，橫坐標是溫度值。通過觀察產生的信號峰和對應溫度，可以判斷產物狀態。
理想情況下，熔解曲線應該是單峰，峰值對應溫度是特異性產物的退火溫度，這才能說明擴增產物中特異性產物占比大。熒光DNA結合染料法的缺點是它們能在反應中結合所有DNA雙鏈，包括在實時熒光PCR中產生的引物二聚體，和其他非特異性產物，引起大量的背景噪聲信號。
這種噪聲會影響我們對靶基因產量的評估，甚至熒光強度和靶基因的起始量、全長根本沒什么關系。
因此，我們使用熒光DNA染料結合法時，需要對擴增產物進行熔解曲線的分析。通過對擴增反應產物逐漸升溫，同時監測每一步的熒光信號來制作熔解曲線。
熔解曲線的縱坐標是熒光信號值，橫坐標是溫度值。通過觀察產生的信號峰和對應溫度，可以判斷產物狀態。
理想情況下，熔解曲線應該是單峰，峰值對應溫度是特異性產物的退火溫度，這才能說明擴增產物中特異性產物占比大。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
