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血管形成實驗容易出現的BUG2022/12/16
血管生長是腫瘤發生的關鍵步驟。通過抑制腫瘤血管生成來阻止腫瘤發展和轉移合乎邏輯。血管生成(angiogenesis)是生殖、生長發育和修復的基礎。腫瘤無新生血管時,直徑很少超過2mm-3mm,其生長處...
貼壁細胞的消化方法2022/12/16
如何消化讓細胞生長的更好，養細胞關鍵還是在消化，以下介紹幾種細胞的消化方法一、酶消化法1、胰酶，這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。消化的時間根據細胞種類、操作手法，溫度等因素而變化，從幾分...
細胞培養如何選擇血清2022/12/16
體外培養的細胞直接生活在培養基中，因此培養基需要滿足細胞對營養成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求；原代提取的時候選擇如何選擇培養基成了關鍵的問題，此外在細胞提取的時候因血清可以模擬個...
染色體制備2022/12/13
原理固定阻滯于分裂中期的細胞，在低滲液中膨脹，將細胞滴在載玻片上，染色，觀察[RothfelsａndSiminovitch，1958；RooneyａndCzepulkowski，1986]。材料與儀器...
染料攝取法測定細胞生存力實驗2022/12/13
原理細胞懸液用碘化丙啶和二乙酰熒光素的混合液染色，用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。材料與儀器步驟材料無菌單細胞懸液雙醋酸熒光素，10ug/ml，溶于HBSS碘化丙啶，500ug/ml非滅菌熒光顯微鏡濾光...
染料排斥法測定細胞生存力實驗2022/12/13
原理萘黑、臺盼藍以及很多其他染料[KahenbachetaL1958]均不能透過活細胞。將細胞懸液與染料混勻，在低倍顯微鏡下檢査。材料與儀器胰蛋白酶巴斯德吸管顯微鏡手執計數器生存力染料血細胞計數板步驟...
前列腺上皮2022/12/13
原理取出前列腺和處理標本（30min），用膠原蛋白酶消化前列腺組織（1h），收集單個細胞和小的細胞團（1h）。接種細胞，培養至形成單層（7d）。材料與儀器胎牛血清或馬血清青霉素卡那霉素霍亂毒索地塞米松...
瓊脂中克隆培養2022/12/13
原理溫度高時瓊脂呈液態，但在37℃時成凝膠狀態，細胞懸浮在溫暖的瓊脂凝膠培養基中，待瓊脂形成凝膠后進行培養，形成散在集落，很容易分離。材料與儀器Noble瓊脂Difco胎牛血清兩倍濃度培養基生長培養基...
分離原代人角膜間質細胞2022/12/9
原理材料與儀器完整的人角膜CMF-SaIineG中性蛋白酶IIL型膠原酶1mgml在DMEMF-12GASP中CMF-SaIineG配制的TrypLEExpress或0.25%膜蛋白酶DMEMF-12...
平滑肌細胞的分離和培養2022/12/9
料與儀器0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液平滑肌培養液Petri培養皿手術刀和10號手術刀片解剖剪組織鑷步驟1.從小牛取胸主動脈。2.將胸主動脈浸入Hanks液。3.分離細胞之前將動脈放在冰上。4.將...
淋巴細胞的分離2022/12/9
原理通過右旋糖酐促沉降作用去除紅血細胞后，將枸櫞酸或肝素抗凝的全血或血漿層加在致密的Ficoll-Hypaque層上面。離心后，大部分淋巴細胞位于Ficoll-Hypaque和血漿之間的界面。材料與儀...
冷胰蛋白酶解離組織2022/12/9
原理剪碎的組織放在胰蛋白酶中于4°C放置16~18h，去除胰蛋白酶后溫育并于溫培養基中分散細胞。材料與儀器組織DBSS粗制胰蛋白酶生長培養基皮氏平皿培養瓶鑷子移液管錐形瓶剪刀冰浴步驟1.將組織（1~5...
昆蟲細胞的擴增2022/12/7
原理用機械法從細胞單層分離細胞，在27°C條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。材料與儀器Sf9細胞二甲基亞砜PluronicF68生長培養液培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱步驟常規維持培養1.通...
結腸直腸腫瘤細胞的培養2022/12/7
原理通常用酶消化腺瘤，用手術刀片將癌組織切碎。如果分化良好的結腸直腸癌標本切開后仍不易分離細胞，可用酶消化方法分離。材料與儀器用于傳代培養的Dispase生長培養液洗液消化液培養瓶步驟一、酶消化1.用...
口腔角質形成細胞2022/12/7
材料與儀器D-PBSA0.17%胰蛋白酶PET轉運培養液生長培養液含抗菌素的生長培養液手術刀和11號刀片眼科剪眼科鑷2把50mm或100mm培養級Petri培養皿35mm和100mm非培養級Petri...
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