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貼壁細胞培養2021/10/29
材料與儀器凍存細胞70%乙醇PBS胰酶／EDTA25cm2和150cm2組織培養瓶CO2培養箱實驗步驟1.將含有凍存細胞的安瓿放入37℃水浴中解凍。2.用70%乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸...
懸浮細胞培養2021/10/29
材料與儀器凍存HeLaS3細胞70%乙醇*MEM-10胰酶／EDTA旋轉瓶*培養基-525cm2組織培養瓶C02培養箱SorvallH-6000A轉子100ml或200ml通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗...
細胞培養技術2021/10/29
簡介一.細胞培養的基本原理細胞培養是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞，用培養基制成細胞懸液，在體外適宜條件下，使細胞生長繁殖，并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養與組織培養、器官培養主要不同點在于...
MDCK細胞培養2021/10/29
簡介一、目的MDCK細胞培養是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員，必須按照本文件相關的操作規程進行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術人員。三、程序（一）生物安全要求實驗...
雙重染色法免疫熒光組織化學染色步驟2021/10/26
材料與儀器：原代培養胚胎14天大鼠端腦細胞，FITC，TRITC實驗步驟：雙重染色法免疫熒光組織化學染色步驟若在同一標本中有兩A和B種抗原需要同時顯示，A抗原的抗體用FITC標記，B抗原的抗體用TRI...
免疫熒光（Immunofluorescence, IF）實驗方法2021/10/26
材料與儀器：免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。它是根據抗原抗體反應的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團，再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢查細胞或組織內的...
免疫熒光技術-間接法2021/10/26
材料與儀器：抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實驗步驟：1.標本固定后，PBS洗滌3x3分鐘；2.滴加一抗，37℃40分鐘或4℃過夜；3.PBS洗3x3分鐘；4.滴加熒光標記二抗37℃，40分鐘；5.PBS洗3...
免疫熒光技術-直接法2021/10/26
材料與儀器：抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實驗步驟：1.標本經固定后，PBS洗滌3×3分鐘；2.加熒光素標記的抗體，濕盒內37℃孵育50分鐘；3.PBS洗滌3×3分鐘；4.0.1%伊文氏蘭復染；5.PBS洗...
冰凍切片和石蠟切片各自的優劣之處是什么？2021/10/26
冰凍切片和石蠟切片各自的優劣之處1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片，而有的一抗只能做冰凍切片，關鍵取決于所要檢測的抗原穩定性，有的抗原不穩定，經過組織固定，脫水、透明、浸蠟...
細胞不長，這些方面您注意了嗎？2021/10/25
Q1培養液pH對細胞生長的影響？答：由于大多數細胞適宜pH為7.2-7.4，偏離此范圍可能對細胞生長將產生有害的影響，目前也有些無血清培養基或者轉染用的培養基PH值會在6.5左右。因為各種細胞對pH的...
NGS建庫人都在用的文庫質量評定方法，你都知道嗎？2021/10/25
高通量測序（NextGenerationSequencing，NGS）近年來飛速發展，在各個領域已被廣泛應用。而文庫的制備是NGS技術中極為重要的步驟。所謂文庫制備（LibraryPreparatio...
病原微生物提取的方法有哪些？2021/10/25
數據統計據WHO統計，全球感染性疾病導致的患者死亡占全部死因的25%以上，在中國，感染性疾病占所有疾病的50%以上，75%造血系統腫瘤患者和50%實體腫瘤患者死于感染，膿毒癥（嚴重感染）患者病死率高達...
常見的DNA損傷類型有哪些？2021/10/25
說起DNA損傷修復，相信大家都很熟悉，但小編今日還是要跟大家再嘮嘮這個話題，講講在二代建庫中，如果DNA存在損傷，那常見的損傷類型有哪些呢？而這些損傷又是如何進行修復的呢？損傷的形成常見的DNA損傷有...
化學感受態細胞進行質粒DNA轉化的原理2021/10/25
背景介紹將質粒DNA轉化入細菌的過程稱為轉化。轉化通常有兩種方法：化學轉化法和電穿孔法。電穿孔法的轉化率高達109～1010個轉化子/μg質粒DNA，轉化率比化學轉化法高，當可能得到的每一個克隆都非常...
ELISA雙抗體夾心法2021/10/22
簡介ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體...
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