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用于懸浮/貼壁哺乳動物真核細胞的大容量核酸轉染儀
LONZA 4D-Nucleofector LV 大規模細胞核轉染系統(4D-Nucleofector LV Unit,簡稱LV模塊,或LV單元),是在傳統電穿孔技術的基礎上,針對每一種細胞,優化電脈沖參數、轉染液,使細胞轉染效率、細胞活率得到顯著提升,解決了原代細胞、干細胞、T細胞等使用傳統電穿孔轉染效率低下的問題。
4D-Nucleofector核轉技術(原德國Amaxa Nucleofection核轉染技術)對質粒DNA轉染效率高達90%,寡核苷酸(如siRNA)轉染效率高達99%,面世20年來,已成功轉染>1200種細胞系、>130種原代細胞,并在干細胞、免疫細胞、神經細胞等各類較難轉染的細胞中獲得了優秀的轉染效果。
同時,4D-Nucleofector核轉染可讓外源基因直接穿過核膜進入細胞核,不依賴細胞有絲,實現2小時快速表達。LONZA 4D-Nucleofector LV模塊可提供單次2×10^9個細胞、封閉、無菌的高效轉染,在人T細胞、CHO懸浮細胞、HEK23懸浮細胞、K562細胞等超過700種細胞中大量應用。
LONZA共享數據庫,包含超過1500種原代細胞、細胞系的轉染數據,提供包括細胞來源、傳代、培養條件、培養基、到轉染后培養技巧的成熟流程,讓研究者在海量數據支持中快速開展實驗,并取得成功。操作4D-Nucleofector核轉染設備時,只需一鍵調用LONZA內置的轉染程序,即可實現細胞快速、高效轉染,而無需自行摸索轉染條件。
4D-Nucleofector核轉染技術優勢
-采用高分子聚合物電極,避免傳統鋁電極的離子毒害,維持細胞生理狀態,提高存活率。
-轉染后可快速觀察實驗結果,例如轉染GFP后2小時可觀察到蛋白。
-無需自己優化條件,擁有超過650種細胞類型的現成程序,可直接使用,共享數據庫,超過1500條轉染數據可供參考。
-可轉染包括DNA、mRNA、miRNA、siRNA、肽、蛋白質在內的多種底物。
-可用于難以轉染的原代細胞、干細胞、神經元、細胞系。
-靈活的轉染規模縮放,可在低、中、高通量中輕松轉移,實現2×10^4至1×10^9個細胞數量的輕松擴展。
-已在8000多家同行評議的出版物中發表。
LONZA 4D-Nucleofector LV大規模細胞核轉染儀,細胞治療基礎研究高效電轉染系統
1、封閉、無菌的系統和耗材設計,滿足細胞治療基礎研究的需求。
2、20mL大容量,LV核轉儀提供單次1mL(最多1×10^8個細胞)的手動加樣、20×1mL(最多2×10^9個細胞)的自動加樣,快速高效。
3、符合cGMP要求,可使用符合美國FDA21 CFR part 11、歐盟Annex 11的軟件進行控制,適用于嚴格監管的GMP實驗室。
①用戶管理(登陸,不同級別)
②具有用戶姓名與時間標記的電子簽名
③任何記錄的修改或是數據的創建均被記錄在案
④結果報告:失敗報告,以及詳細的問題描述
⑤可根據21CFR part11的要求導出數據(加密,預防)
⑥審計追蹤(使用記錄、更改記錄)
⑦無數據刪除可能
4、規模可簡單放大,在4D-Nucleofector X模塊(4D-Nucleofector X Unit,簡稱X模塊,或X單元)上進行的2×10^4細胞數量的優化轉染方案,可直接在LV模塊上使用。
實驗數據:分別用4D-Nucleofector細胞核轉儀X模塊(100μL)、LV模塊(1mL)向包括人T細胞、PBMC、293細胞、CHO細胞在內多種代表性細胞中轉染pmaxGFP載體,實現轉染規模的線性放大。
參考文獻
1.Closed-system transposon-mediated manufacture of GMP grade CAR T-cells via the Lonza Nucleofector LV XL. LM Brownrigg,et al. ELSERIER(2020)
2.Biomimetic mineralized collagen scaffolds and their effect on osteogenic differentiation. L Luo,et al. ELSERIER(2020)
3.Optimization of clarification process for viral vectors. B Raghavan,et al. ELSERIER(2020)
4.Generation and testing of clinical-grade exosomes for pancreatic cancer. Mayela Mendt,et al. JCI Insight(2018)
5.Off the shelf T cell therapies for hematologic malignancies. BJ McCreedy,et al. ELSERIER(2018)
6.Unlocking the Potential of CRISPR-Based Gene Editing. Andrea Toell. Genetic Engineering & Biotechnology News(2017)
品牌 | 瑞士LONZA龍沙 | |
產地 | 德國科隆 | |
名稱 | 4D-Nucleofector LV大規模細胞核轉染系統 | |
型號 | LV | |
貨號 | AAF-1002B | Core模塊,程序模塊 |
AAF-1002L | LV模塊 | |
用途 | 用于干細胞、原代細胞、細胞系的大規模高效轉染 | |
適用細胞 | 哺乳動物懸浮細胞,貼壁細胞(消化后),包括難轉染的血液系統細胞和干細胞 | |
轉染物 | 質粒、RNA、蛋白質、小分子化合物等 | |
銷售 | 中國大陸一級代理(不含港澳臺) | |
價格 | 詢價 | |
貨期 | 國內現貨1周(如無現貨則為4-6周) | |
服務 | 售前技術咨詢,裝機,售后服務(售后限北京澤平銷售儀器) |
注:常用模塊組合參考:C+X+LV,X模塊用于小規模優化轉染條件,LV模塊用于大規模轉染。
LONZA 4D-Nucleofector LV大規模核轉染系統,基因治療研究的不二工具。
1、作為非病毒轉染技術,適用于不同的基因編輯系統,如鋅指核酸酶(ZFN)、轉錄激活因子樣效應物核酸酶(TALEN)、CRISPR/Cas系統。
2、可轉染多種不同的底物,如DNA、mRNA、蛋白(如Cas9 RNP),由于轉染條件相同,可進行不同底物的簡單共轉染。
3、常用于應用iPS、CD34+造血干細胞、T細胞的穩定修飾。
4、技術成熟可靠,有≥80本基因編輯相關出版物刊載,眾多領域的學者正在使用4D-Nucleofector技術,發表文章超過10,000篇,并持續不斷增加中!
LONZA 4D-Nucleofector大規模核轉染系統,作為轉染人原代T細胞的強大方法,與CRISPR和其他基因組編輯技術的聯合應用,已成為基因治療基礎研究的理想工具。
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