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目錄:優利科(上海)生命科學有限公司>>科研試劑盒>>PCR試劑盒>> 牛副結核分歧桿菌(MPB)核酸檢測試劑盒

牛副結核分歧桿菌(MPB)核酸檢測試劑盒
  • 牛副結核分歧桿菌(MPB)核酸檢測試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 YLKBIO
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 產品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 上海
屬性

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更新時間:2024-06-26 13:20:48瀏覽次數:991評價

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供貨周期 現貨 規格 50T
貨號 YLK10002P 應用領域 化工,生物產業
主要用途 科研實驗 英文名稱 Diagnostic?Kit?for?Mycobacterium?Paratubercu?Bovis
MPB?反應液 500μL×2?管 MPB?陽性質控品 50μL?×1?管
陰性質控品 250μL?×1?管 保存條件 -20℃±5℃,避光保存
有效期 12個月 試劑盒說明 不同批號的試劑盒組分不可交互使用
牛副結核分歧桿菌(MPB)核酸檢測試劑盒適用于檢測氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的牛副結核分歧桿菌,用于牛副結核分歧桿菌感染的輔助診斷,其檢測結果僅供參考。

通用名稱:牛副結核分歧桿菌(MPB)核酸檢測試劑盒(熒光 PCR 法)

Name:Diagnostic Kit for Mycobacterium Paratubercu Bovis DNA(Real-Time PCR Method)

【包裝規格】50T/盒

【預期用途】

牛副結核分歧桿菌(MPB)核酸檢測試劑盒適用于檢測氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的牛副結核分歧桿菌,用于牛副結核分歧桿菌感染   的輔助診斷,其檢測結果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針法實時熒光 PCR 技術,設計一對牛副結核分枝桿菌特異性引物,結合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術對牛副結核分枝桿菌的 DNA 進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

【試劑組成】

名      稱

50T/盒

MPB 反應液

500μL×2   管

酶液

50μL×1 管

MPB 陽性質控品

50μL   ×1 管

陰性質控品

250μL ×1 管

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數不超過 5 次,有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】

病死或撲殺動物,無菌采集肺病變部位或病變/非病變部位交界處的樣品;活動物滅菌棉拭子沾取氣管分泌   物,放入無菌試管中

【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸, 嚴禁反復凍融。

【使用方法】

1.  樣品處理(樣本處理區)

1.1  樣本前處理

組織樣品:每份組織分別從 3 個不同的位置稱取樣品約 1g,手術/剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入1.5mL 生理鹽水后繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中;咽拭/子樣品直接取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。

1.2  核酸提取

推薦采用公司生產的核酸提取/或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進行核酸提取,請按照試劑說明書進行操作。

2.  試劑配制(試劑準備區)

根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿

10 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:

試劑

MPB 反應液

酶液

用量(樣本數為 N)

20μL

1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,21uL/管。

3.  加樣(樣本處理區)

將步驟 1 提取的核酸、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL,分別加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻, 短暫離心。

4.  PCR 擴增(核酸擴增區)

4.1  將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;

4.2  設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25μL;


熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請勿選擇

ROX 參比熒光,選擇 None 即可。

4.3  推薦循環參數設置:

步驟

循環數

溫度

時間

收集熒光信號

1

1 cycle

95℃

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec

5.  結果分析判定

5.1  結果分析條件設定

設置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲線出現整體傾斜時,根據分析后圖像調節 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內調節)、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節),以及 Threshold 的Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。

5.2  結果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35,且曲線有明顯的指數增長曲線;

可疑:檢測通道 35<Ct 值≤38,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 35<Ct 值≤38,且曲線有明顯的增長曲線, 判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

6.  質控標準

陰性質控品:Ct>38 或無 Ct 值顯示;

陽性質控品:擴增曲線有明顯指數生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。

7.  檢測方法的局限性

1. 樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;

2. 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現假陽性結果;

3. 陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;

4. 病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;

5. 不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;

6. 試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果;

7. 本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

【注意事項】

1. 所有操作嚴格按照說明書進行;

2. 試劑盒內各種組分使用前應自然融化,wan全混勻并短暫離心;

3. 反應液應避光保存;

4. 反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5. 使用一次性吸頭、一次性手套和各區專用工作服;

6. 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行,以免交叉污染;

7. 實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

8. 試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫學實驗室生物安全通則》進行處理。


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