目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研試劑盒>>ELISA試劑盒>> 96T/48T生長因子ELISA試劑盒
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更新時(shí)間:2024-06-27 09:44:03瀏覽次數(shù):4249評(píng)價(jià)
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CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T/48T |
貨號(hào) | YLK-1007E | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 |
生長因子ELISA試劑盒介紹:
本試劑盒僅供研究使用。
使用目的:
本試劑盒用于測(cè)定人、小鼠、大鼠、豚鼠、豬、雞、兔子血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)、細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)含量。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)、細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)水平。用純化的血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)、細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)、細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4),再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)、細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)、細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)、細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4) (VEGF)濃度。
試劑盒組成:
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(2400pg/ml) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個(gè) |
標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
1200pg/ml | 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600pg/ml | 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300pg/ml | 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150pg/ml | 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
75pg/ml | 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié):
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
生長因子ELISA試劑盒保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月。
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大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 | Rat Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA試劑盒 |
大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 | Rat Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA試劑盒 |
大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 | Rat Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA試劑盒 |
大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒 | Rat Nerve growth factor,NGF ELISA試劑盒 |
大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 | Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA試劑盒 |
大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 | Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA試劑盒 |
豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 | guinea pig transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA試劑盒 |
豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 | guinea pig hepatocyte growth factor,HGF ELISA試劑盒 |
豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 | Guinea pig Epidermal growth factor,EGF ELISA試劑盒 |
豬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒 | Porcine Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA試劑盒 |
豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 | Porcine soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA試劑盒 |
豬血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒 | Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA試劑盒 |
豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 | Porcine transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA試劑盒 |
豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒 | Porcine insulin-like growth factors binding protein 3,IGFBP-3 ELISA試劑盒 |
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 | Porcine insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA試劑盒 |
豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 | Porcine insulin-like growth factors-1,IGF-1 ELISA試劑盒 |
豬角化細(xì)胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒 | Porcine Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA試劑盒 |
豬肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 | Porcine hepatocyte growth factor,HGF ELISA試劑盒 |
豬表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 | Porcine Epithelial growth factor,EGF ELISA試劑盒 |
豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 | Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISA試劑盒 |
雞轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒 | Chicken Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA試劑盒 |
雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 | Chicken Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA試劑盒 |
雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 | Chicken Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA試劑盒 |
雞堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒 | Chicken basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA試劑盒 |
雞表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 | Chicken Epidermal growth factor,EGF ELISA試劑盒 |
雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 | Chicken Insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA試劑盒 |
駱駝轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 | Camel transforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA試劑盒 |
鹿胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒 | Deer Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA試劑盒 |
兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 | Rabbit transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA試劑盒 |
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 | Rabbit Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA試劑盒 |
兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 | rabbit Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA試劑盒 |
兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 | rabbit Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA試劑盒 |
兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 | rabbit Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA試劑盒 |
兔子血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 | rabbit platelet-derived growth factor,PDGF ELISA試劑盒 |
兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒 | rabbit Nerve growth factor,NGF ELISA試劑盒 |
兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒 | rabbit basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA試劑盒 |
兔子肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 | rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA試劑盒 |
兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 | Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA試劑盒 |
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)