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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研試劑盒>>ELISA試劑盒>> 96T/48T免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫試劑盒

免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫試劑盒
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參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 YLKBIO
  • 型號(hào) 96T/48T
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海
屬性

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更新時(shí)間:2024-06-27 09:52:33瀏覽次數(shù):737評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T/48T
貨號(hào) YLK-1011E 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研
免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫試劑盒用于測(cè)定小鼠、人、大鼠、豬、 兔子血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白 M(IgM)含量。

 免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫試劑盒


本試劑盒僅供研究使用。

使用目的:

本試劑盒用于測(cè)定小鼠、人、大鼠、豬、 兔子血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白 M(IgM)含量。


實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中免疫球蛋白 M(IgM)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白 M(IgM),再與 HRP 標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB

HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白 M(IgM)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度OD ,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中免疫球蛋白 M(IgM)濃度。

試劑盒組成

1

30 倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1

8

標(biāo)準(zhǔn)品(8ng/ml

0.5ml×1

3

酶標(biāo)包被板

12 ×8

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說(shuō)明書

1

5

顯色劑 A

6ml×1

11

封板膜

2

6

顯色劑 B

6ml×1/

12

密封袋

1 個(gè)


標(biāo)本要求

1. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2. 不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。


操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀  釋。

4ng/ml

5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2ng/ml

4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1ng/ml

3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0.5ng/ml

2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0.25ng/ml

1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 

 

2. 加樣:分別設(shè)空白孔空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl


然后再加待測(cè)樣品 10μl樣品最終稀釋度為 5 。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同 3。

8. 洗滌:操作同 5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

10 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色

11. 測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度OD  測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

操作程序總結(jié):

637861489646704625219.png

計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的

OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。


注意事項(xiàng)

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高樣本 OD 大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD ,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)n 后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物請(qǐng)避光保存。

7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

      9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。


免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫試劑盒保存條件及有效期

1. 試劑盒保存:;2-8℃。

2. 有效期:6 個(gè)月


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