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目錄:優利科(上海)生命科學有限公司>>科研試劑盒>>ELISA試劑盒>> 96T/48T細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒

細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒
  • 細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒
  • 細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒
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  • 細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒
  • 細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 YLKBIO
  • 型號 96T/48T
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 上海
屬性

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更新時間:2024-06-27 10:09:17瀏覽次數:675評價

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CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現貨 規格 96T/48T
貨號 YLK-1020E 應用領域 化工,生物產業
主要用途 科研
細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)呈正相關。

細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒


本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷


檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

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自備物品

1. 酶標儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱


試劑的準備

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。



樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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洗板方法

1.  手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。


操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本-稀釋液40μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果判斷

繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。


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細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒性能

1.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

2.  靈敏度:最-低檢測濃度小于1.0 ng/mL。

3.  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4.  重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.  有效期:6個月


操作注意事項

1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,最終結果乘以5才是樣本實際濃度。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

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