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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復蘇/凍存人胰腺星狀細胞

人胰腺星狀細胞
  • 人胰腺星狀細胞
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 ATCC
  • 型號 復蘇/凍存
  • 廠商性質 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-07-09 09:24:33瀏覽次數(shù):411評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
貨號 YLK-XB0533h 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 組織來源 胰腺組織
人胰腺星狀細胞正常胰腺組織中星狀細胞為靜止狀態(tài),靜態(tài)的胰腺星狀細胞內(nèi)含維生素A脂滴和油脂酸視/黃醇,并具有攝取和酯化視/黃醇的功能,但是不具備促纖維化作用。

人胰腺星狀細胞


產(chǎn)品名稱 :人胰腺星狀細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0533h

組織來源 :胰腺組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

正常胰腺組織中星狀細胞為靜止狀態(tài),靜態(tài)的胰腺星狀細胞內(nèi)含維生素A脂滴和油脂酸視/黃醇,并具有攝取和酯化視/黃醇的功能,但是不具備促纖維化作用。

致胰腺損傷的各種刺激因子使胰腺星狀細胞活化時,其細胞內(nèi)脂滴消失,轉化為成肌纖維細胞樣的表型細胞,具有致纖維原性和平滑肌細胞的特點:與細胞外基質的主要成分如I型、Ⅲ型膠原蛋白、纖維連接蛋白、層粘連蛋白的抗體呈強陽性染色反應。提示細胞外基質的大量合成及沉積。此過程近來已經(jīng)在動物模型及慢性胰腺炎患者的胰腺組織中得到證實。原位雜交顯示纖維化的胰腺中呈僅α-SMA染色陽性的細胞正是產(chǎn)生膠原的主要來源。


細胞特性

1) 細胞來源于人正常胰腺組織。

2) 細胞鑒定:結蛋白(Desmin)或者平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5) 細胞生長方式:長梭狀,星狀細胞,貼壁培養(yǎng)。


質量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。


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