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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復蘇/凍存大鼠附睪上皮細胞

大鼠附睪上皮細胞
  • 大鼠附睪上皮細胞
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 YLKBIO
  • 型號 復蘇/凍存
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-07-10 20:07:12瀏覽次數(shù):672評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
貨號 YLK-XB1294h 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 組織來源 附睪
大鼠附睪上皮細胞分離自附睪組織;附睪(Epididymis)是一個由曲折、細小的管 子構成的器官,一端接著輸精管(D uctusdeferens),一端接著睪丸(T estis)的曲細精管,具體結構主要包括輸出小管和附睪管。

大鼠附睪上皮細胞

產(chǎn)品名稱 :大鼠附睪上皮細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1294h

組織來源 :附睪

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

附睪上皮細胞分離自附睪組織;附睪(Epididymis)是一個由曲折、細小的管 子構成的器官,一端接著輸精管(D uctusdeferens),一端接著睪丸(T estis)的曲細精管,具體結構主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣,可分為頭、體、尾三部。精子離開睪丸后通過輸出小管進入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養(yǎng)精子的功能,以促進精子的進一步成熟附睪的功能是暫存精子,促進精子的進一步成熟。精子在附睪內(nèi)獲得運動能力,總共停留8~17天,最終達到功能上的成熟。在這個過程中,精子除了自身的因素,還受到附睪微環(huán)境的影響,這包括了一系列的物理、化學變化和精子形態(tài)的改變。可以說,附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件。

若附睪的功能發(fā)生異常,精子則不能成熟,引起不育。附睪上皮含有主細胞、基細胞、亮細胞等幾種類型細胞。基細胞,其頂部離附睪管腔有一定距離,在附睪各部分,其形態(tài)沒有差別,一般認為是貯備細胞;另一種主細胞,是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎,在各區(qū)段的主細胞形態(tài)結構差別很大,這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異。除上皮細胞外,附睪的管壁組織結構也有規(guī)律性的變化,附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮,而尾部平滑肌就沒有這種特點,僅在射精一瞬間出現(xiàn)強烈的節(jié)律收縮。作為負責提供適合精子成熟微環(huán)境的附睪,具有活躍的分泌與吸收功能。其中,附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉運,對保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和酸堿度,為精子成熟提供適宜的環(huán)境起著相當重要的作用。

睪丸的支持細胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液,如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液,而從附睪排  出的只不過幾百微升,也就是說睪丸分泌液有99% 被附睪上皮重新吸收回體內(nèi)。動物實驗表明,結扎輸精管時睪丸不會腫脹,但若結扎睪丸輸出小管,睪丸第二天就會腫脹,這就充分證實了附睪存在著強有力的吸收功能,但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細胞對精子的發(fā)育、成熟,不孕bu育,附睪生理基礎功能研究具有重要意義。


細胞特性

1) 組織來源于動物的正常附睪組織。

2) 細胞鑒定:PCK免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

細胞生長方式:鋪路石樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 :  鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養(yǎng)  基 :  含F(xiàn)BS、EG F、H ydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、T ransferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :  每2-3天換液一次
生長特性 :  貼壁
細胞形態(tài) :  上皮細胞樣
傳代特性 :  可傳1-2代
傳代比例 :  1:2
消 化  液 :  0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%


該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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