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目錄:優利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復蘇/凍存人宮頸癌成纖維細胞

人宮頸癌成纖維細胞
  • 人宮頸癌成纖維細胞
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 ATCC
  • 型號 復蘇/凍存
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-07-09 14:34:10瀏覽次數:215評價

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供貨周期 現貨 規格 5*10^5
貨號 YLK-XB0688h 應用領域 化工,生物產業
主要用途 科研 組織來源 宮頸癌組織
人宮頸癌成纖維細胞分離自患有宮頸癌病人的宮頸癌組織;宮頸癌也稱子宮頸癌,指發生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤,是女性常見惡性腫瘤之一,發病率位于女性腫瘤的第二位。

人宮頸癌成纖維細胞

產品名稱 :人宮頸癌成纖維細胞

產品貨號 :YLK-XB0688h

組織來源 :宮頸癌組織

產品規格 :5×105cells/T25細胞培養瓶


細胞簡介:

宮頸癌組織源成纖維細胞分離自患有宮頸癌病人的宮頸癌組織;宮頸癌也稱子宮頸癌,指發生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤,是女性常見惡性腫瘤之一,發病率位于女性腫瘤的第二位。宮頸癌可向鄰近組織和器官直接蔓延,向下至陰道穹窿及陰道壁,向上可侵犯子宮體,向兩側可侵犯盆腔組織,向前可侵犯膀胱,向后可侵犯直腸。也可通過淋巴管轉移至宮頸旁、髂內、髂外、腹股溝淋巴結,晚期甚至可轉移到鎖骨上及全身其他淋巴結。血行轉移比較少見,常見的轉移部位是肺、肝及骨。腫瘤微環境即腫瘤細胞生存的外部環境,由不同種類的非腫瘤性的細胞與細胞外基質(E xtracellularm atrix,EC M )構成,包括纖維細胞,免疫細胞,內皮細胞,間充質干細胞等,腫瘤細胞通過調控這些間質細胞,創造出有利于自身侵襲轉移的條件,從而使得腫瘤得到進展。

越來越多的證據表明,腫瘤微環境的改變在腫瘤進展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環境中,研究最多也是最主要的間質細胞是腫瘤相關成纖維細胞(can cer-asso ciated fibrobla sts,C A Fs)。C A Fs主要由腫瘤周邊的正常成纖維細胞和成纖維細胞樣細胞演化而來。宮頸癌組織源成纖維細胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。剛分離的宮頸癌組織源成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。


質量檢測

優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養信息

培 養  基 : 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細胞形態 : 成纖維細胞樣
傳代特性 : 可傳5代左右;3代以內狀態最佳
傳代比例 : 1:2
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決

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