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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存小鼠食管上皮細(xì)胞

小鼠食管上皮細(xì)胞
  • 小鼠食管上皮細(xì)胞
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 ATCC
  • 型號 復(fù)蘇/凍存
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-07-09 16:33:38瀏覽次數(shù):262評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
貨號 YLK-XB0747h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 組織來源 食管組織
小鼠食管上皮細(xì)胞分離自食管組織。食管是咽和胃之間的消化管,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,隨著頸部的伸長和心肺的下降,而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。

小鼠食管上皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :小鼠食管上皮細(xì)胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0747h

組織來源 :食管組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

食管上皮細(xì)胞分離自食管組織。食管是咽和胃之間的消化管,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,隨著頸部的伸長和心肺的下降,而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。

在發(fā)育過程中,食管的上皮細(xì)胞增殖,由單層變?yōu)閺?fù)層,食管使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,耐摩擦,有保護(hù)作用。在食管與胃賁門交界處,復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復(fù)層扁平上皮細(xì)胞覆蓋,其頂端細(xì)胞膜和細(xì)胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障,防止食管內(nèi)容物的滲入。

特別的是,層屏障使表層細(xì)胞的基質(zhì)外側(cè)細(xì)胞膜和深層細(xì)胞的全部細(xì)胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學(xué)上講,食管上皮由兩層組成,基底層和分化層。其中,僅基底層的細(xì)胞可以增殖,然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達(dá)。食管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機(jī)制和食管癌變機(jī)制的非常好的體外模型。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :上皮細(xì)胞樣
傳代特性 :可傳1-2代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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