| 供貨周期 |
現貨 |
規格 |
5*10^5 |
| 貨號 |
YLK-XB0963h |
應用領域 |
化工,生物產業 |
| 主要用途 |
科研 |
組織來源 |
脊髓組織 |
小鼠脊髓微血管內皮細胞脊髓微血管內皮細胞是血-脊髓屏障的重要組成部分，參與調節脊髓微循環血流，脊髓微血管內皮細胞的功能變化和多種脊髓疾病相關。
血脊髓屏障（blood spinal cord barrier，BSCB）是血液和中樞神經系統之間的一個生理屏障，減少血液中有害成分對組織的侵蝕。內皮細胞、周細胞、星形膠質細胞、基質膜、小窩蛋白、粘附連接和緊密連接蛋白共同構成了這一屏障結構。
小鼠脊髓微血管內皮細胞
產品名稱 ：小鼠脊髓微血管內皮細胞
產品貨號 ：YLK-XB0963h
組織來源 ：脊髓組織
產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介：
脊髓微血管內皮細胞分離自脊髓組織。脊髓是細細的管束狀的神經結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護。是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發出成對的神經，分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H 形（蝴蝶型）灰質區，主要由神經細胞構成。在灰質區周圍為白質區，主要由有髓神經纖維組成。脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經（稱為脊神經）分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。微血管又稱毛細血管。
分布于各種組織和細胞間的最微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7～9微米，數量極多，成網狀分布。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成，厚約0. 5微米。基膜外面有薄層結締組織，其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。最細的毛細血管由一個內皮細胞圍成管腔，較粗的毛細血管由2～3個內皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經組織和結締組織中的毛細血管，內皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續毛細血管。分布于內分泌腺、腎臟等處的毛細血管，除有縫隙連接外，細胞本身有許多小孔，（孔徑800～1000埃），稱有孔毛細血管。分布于肝、脾、骨髓及某些內分泌腺的毛細血管，管腔擴大，稱血竇。毛細血管的管壁薄、通透性大、管徑細（8～10微米）、數量多、血流速度慢，這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所，又稱交換血管。
血竇（sinusoid）由毛細血管管腔擴大而成，竇壁的一般結構與毛細血管壁相同，由單層內皮 細胞構成，內皮細胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結構各有差別。脾血竇的內皮細胞間有較寬裂隙。肝血竇內皮細胞是不連續的，有較寬的細胞隙（0. 1～0. 5微米）。肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜，通透性比毛細血管大，較大的蛋白質和血細胞可以通過。肝血竇壁內有枯否細胞，脾血竇內外有巨噬細胞，這兩種細胞都有吞噬能力，可吞噬清除血液中的異物、細菌等有害物質，是機體單核巨噬細胞系統的重要組成分。某些內分泌腺的血竇有連續的基膜。
細胞特性
1) 組織來源于實驗動物的脊椎組織。
2) 細胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）免疫熒光染色為陽性。
3) 經鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5) 細胞生長方式：鋪路石狀細胞，不規則細胞，貼壁培養。
質量檢測
優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 ：PLL（0. 1m g/ml），明膠（0. 1%）
培 養 基 ：含FBS、EG F、bFG F、IG F、V EG F、H eparin、H ydrocortisone、P enicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：內皮細胞樣
傳代特性 ：可傳2-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養條件 ：氣相：空氣，95% 。C O2，5%
該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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