兔腹腔巨噬細胞
產品名稱 ：兔腹腔巨噬細胞
產品貨號 ：YLK-XB1001h
組織來源 ：腹腔液
產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介：
腹腔巨噬細胞分離自腹腔。腹腔，即軀干腹部的腔，內襯腹膜，由體壁、橫膈膜和盆底圍成，其內容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件) 等其他內臟器官。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養，并可進行純化。
巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養，難以長期生存。巨噬細胞(M acrophages) 是一種位于組織內的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內參與非特異性防衛(先天性免疫) 和特異性防衛(細胞免疫) 。
它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化) ，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。巨噬細胞功能及其在疾病發生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一。腹腔巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。
細胞特性
1) 組織來源于實驗動物的腹腔組織。本細胞為終末分化細胞，增殖能力很弱，建議客戶收到細胞后直接用于后續實驗，不要進行擴增培養。
2) 細胞鑒定：CD68免疫熒光染色為陽性。
3) 經鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5) 細胞生長方式：不規則細胞，貼壁培養。
質量檢測
優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：巨噬細胞樣
傳代特性 ：屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群
傳代比例 ：不傳代
消 化 液 ：利多ka因(12m M )
培養條件 ：氣相：空氣，95% 。C O2，5%
該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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