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參考價(jià)	面議

科研細(xì)胞

細(xì)胞系

原代細(xì)胞

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	5*10^5
貨號(hào)	YLK-XB1013h	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途	科研	組織來(lái)源	肌腱組織

兔肌腱干細(xì)胞2007年美國(guó)學(xué)者從人和兔的肌腱中分離出一種具有自我更新能力的細(xì)胞，將其命名為肌腱干細(xì)胞或祖細(xì)胞。
肌腱病在高運(yùn)動(dòng)量的人群中常見(jiàn)，以局部疼痛、腫脹等為臨床特征，常見(jiàn)發(fā)病部位為肩袖、岡上肌、髕腱及跟腱。有研究表明，慢性腱病的發(fā)生、發(fā)展可能是肌腱干細(xì)胞發(fā)生錯(cuò)誤分化所致。

詳細(xì)介紹

兔肌腱干細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：兔肌腱干細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) ：YLK-XB1013h

組織來(lái)源：肌腱組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

肌腱干細(xì)胞分離自肌腱組織。肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織，便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上，是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動(dòng)不同骨的運(yùn)動(dòng)。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分，肌腹由肌纖維構(gòu)成，色紅質(zhì)軟，有收縮能力，肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成，色乳白較硬，沒(méi)有收縮能力。

肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長(zhǎng)肌的肌腱多呈圓索狀，闊肌的肌腱闊而薄，呈膜狀，又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說(shuō)的紅肌，而肌腱即為白肌，分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細(xì)胞(T SC s) 是一種來(lái)源于肌腱組織的間充質(zhì)干細(xì)胞，其具有多向分化潛能，并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時(shí)該細(xì)胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等干細(xì)胞的普遍特性。肌腱干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞、軟骨樣細(xì)胞、骨細(xì)胞分化。

在裸鼠模型中，肌腱干細(xì)胞還可以形成肌腱樣組織，軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞而言，T SC s具有更好的克隆形成能力和增殖能力，軟骨相關(guān)基因和肌腱相關(guān)基因表達(dá)更高，具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。

細(xì)胞特性

1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肌腱組織。

2) 細(xì)胞鑒定：CD44免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

質(zhì)量檢測(cè)

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng) 基：含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài) ：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳5代左右。3代以內(nèi)狀態(tài)佳

傳代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95% 。C O2，5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1) 收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。

3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。

4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。

5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。

注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。