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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
  • 大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 YLKBIO
  • 型號(hào) 復(fù)蘇/凍存
  • 廠(chǎng)商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時(shí)間:2024-07-10 14:44:26瀏覽次數(shù):221評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
貨號(hào) YLK-XB1135h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 組織來(lái)源 腦動(dòng)脈組織
大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞腦動(dòng)脈為肌型動(dòng)脈,管壁薄,血管周?chē)鷽](méi)有支持組織。但腦動(dòng)脈血管內(nèi)膜厚,有發(fā)達(dá)的內(nèi)彈力膜。
血管新生是從原有血管系統(tǒng)的內(nèi)皮細(xì)胞增殖、游走而形成新的子代血管分支的過(guò)程。腦動(dòng)脈新生可以重建有效血供,從而改善多發(fā)性、彌漫性腦動(dòng)脈粥樣硬化所致的腦缺血,最終預(yù)防癡呆和腦梗死發(fā)生。

大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱(chēng) :大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB1135h

組織來(lái)源 :腦動(dòng)脈組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡(jiǎn)介:

腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦動(dòng)脈組織;腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán);靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行,所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈;各級(jí)靜脈都沒(méi)有瓣膜,它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。

腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能:①維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡;②合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì);③維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。


細(xì)胞特性
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腦動(dòng)脈組織。
2)細(xì)胞鑒定:血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


質(zhì)量檢測(cè)

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 : PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 : 貼壁
細(xì)胞形態(tài) : 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 : 可傳2-3代
消 化  液 : 0.25%胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95%;CO2,5%


該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶(hù)收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴(lài)氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。

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