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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存大鼠小腦顆粒細(xì)胞

大鼠小腦顆粒細(xì)胞
  • 大鼠小腦顆粒細(xì)胞
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 YLKBIO
  • 型號 復(fù)蘇/凍存
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時(shí)間:2024-07-10 15:03:57瀏覽次數(shù):213評價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
貨號 YLK-XB1145h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 組織來源 腦組織
大鼠小腦顆粒細(xì)胞分離自小腦皮層組織。神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)與功能單位,小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元,直徑約10μm ,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富,近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半。由于小腦神經(jīng)元的生長、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似,而且數(shù)量多、便于取材,因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長發(fā)育、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機(jī)制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段。

大鼠小腦顆粒細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :大鼠小腦顆粒細(xì)胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1145h

組織來源 :腦組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

小腦顆粒細(xì)胞分離自小腦皮層組織。神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)與功能單位,小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元,直徑約10μm ,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富,近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半。由于小腦神經(jīng)元的生長、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似,而且數(shù)量多、便于取材,因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長發(fā)育、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機(jī)制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段。

小腦顆粒神經(jīng)元是小腦主要的中間神經(jīng)元,在哺乳動物的小腦內(nèi)數(shù)量最為豐富。顆粒神經(jīng)元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯(lián)系,形成小腦皮層內(nèi)的神經(jīng)元環(huán)路,在小腦的神經(jīng)活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中,病變可波及小腦顆粒神經(jīng)元,導(dǎo)致小腦皮層的神經(jīng)元環(huán)路受損,從而呈現(xiàn)神經(jīng)性行為失調(diào)。

研究小腦顆粒神經(jīng)元在動物傳染性海綿狀腦病病理學(xué)變化中的反應(yīng)、病理發(fā)生的機(jī)理特別是分子機(jī)理,有賴于小腦顆粒神經(jīng)元細(xì)胞模型的建立。小腦顆粒細(xì)胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維,正是這種排列保證了興奮的單向傳導(dǎo),這是小腦功能理論中的關(guān)鍵假設(shè),小腦顆粒細(xì)胞通過g-氨基丁酸接受戈?duì)柤?xì)胞的抑制性突觸的信息傳入。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 :PLL(0. 1m g/ml)
培 養(yǎng)  基 :含B -27、P enicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 :屬于終末分化細(xì)胞。屬于不增殖細(xì)胞群
傳代比例 :不傳代
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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