細胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)環(huán)境中最重要的組成部分,主要為細胞提供必要的營養(yǎng)、生長因子和激素等70-100種不同化學成分,并調節(jié)培養(yǎng)物的pH值和滲透壓。
最初的細胞培養(yǎng)實驗使用的是從組織提取物和體液中獲得的天然培養(yǎng)基,隨著對培養(yǎng)基質量的需求不斷增長,天然培養(yǎng)基逐漸發(fā)展為合成培養(yǎng)基,即所有的化學成分和含量都確定的培養(yǎng)基。
細胞培養(yǎng)基可根據(jù)血清含量的不同,分為含血清培養(yǎng)基、減血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基三種,其中含血清培養(yǎng)基通常含有10-20%胎牛血清,減血清培養(yǎng)基通常含有1-5%胎牛血清。動物血清成分復雜,含有豐富的蛋白質、多肽、氨基酸、脂肪酸、葡萄糖、激素等,其組分及含量常依動物性別、年齡、生理狀態(tài)、營養(yǎng)條件不同而有差異。盡管大部分成分已知,仍然存在不清楚的組分。因而血清在細胞培養(yǎng)中的作用至今沒有WAN全明確。由于不同生產廠家的血清間及同一廠家生產的不同批次的血清間所含因子的質量和數(shù)量差異大,因此影響細胞培養(yǎng)的可重復性,制約動物細胞規(guī)?;囵B(yǎng)。很多研究人員為了保證同一實驗的一致性,不得不購買和儲存大量同一批次的經篩選后確定為優(yōu)質的血清。這一問題也使得比較不同研究者的實驗數(shù)據(jù)極為困難。因此在含血清培養(yǎng)基的基礎上發(fā)展出了減血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基。
減血清培養(yǎng)基
在細胞培養(yǎng)實驗中,減少血清不良影響的另一種策略是使用減血清培養(yǎng)基。減血清培養(yǎng)基是富含營養(yǎng)物質和動物源性因子的基礎培養(yǎng)基配方,可減少所需的血清量。
Opti-MEM™ I減血清培養(yǎng)基是一種經過改良的ZUI低必需培養(yǎng)基 (MEM),能夠使胎牛血清添加量減少至少 50%,而生長速率或形態(tài)無變化。還推薦 Opti-MEM™ I 培養(yǎng)基與陽離子脂質體轉染試劑(如 Lipofectamine™ 試劑)配套使用。Opti-MEM™ I 培養(yǎng)基可用于各種懸浮和貼壁的哺乳動物細胞,包括 Sp2、AE-1、CHO、BHK-21、HEK 和原代成纖維細胞。針對廣泛的細胞培養(yǎng)應用,提供了多種組分的 Opti-MEM™ I 改良培養(yǎng)基。
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