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上海佰利萊生物科技有限公司
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大鼠納豆激酶(NK)elisa試劑盒 說明書

時間:2023/2/23閱讀:636
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檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被納豆激酶(NK)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的納豆激酶(NK)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品活性
操作步驟

  1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

  2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL。

  3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

  4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

  5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

  6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

  7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。



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