大鼠ELISA試劑盒選購后需注意哪些:
1.檢查檢查說明書、包裝盒的質量,通常偽劣產品為了降低成本,印刷的質量會比較差。其次仔細閱讀說明書,如上所示查找ELISA的性能指標。
2.實驗
(1)利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原a. 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液;b. 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體;c. 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物;d. 實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;e. 如果標準曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
(2)如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假a. 取出購買的試劑盒A的包被板兩條;b. 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線;c. 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線;d. 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物;e. 實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;f. 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
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