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抗體保存溫度和條件
抗體的保存方法一般會直接影響抗體的活性和使用效果。在保存得當(dāng)?shù)那闆r下,大部分抗體可以存放數(shù)月甚至數(shù)年,一般情況需嚴(yán)格按照抗體說明書來進(jìn)行保存。
抗體保存溫度和條件:
1、抗體收到后,需在12000rpm離心1~5分鐘,再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存,如果抗體體積不足50 ul,可延長離心時間至 5 分鐘,從而確保抗體全部離心下來。
2、 對于多數(shù)抗體而言,分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是zui jia選擇。腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存,因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長期在置于4℃條件會導(dǎo)致抗體的降解。
分裝成小等份可zui大程du減少由凍融造成的損傷,以及從單個試劑瓶中多次吸取而引入的污染。
小等份只需凍融一次,如有剩余,可將剩余物保存于4℃。小等份的量取決于實驗人員在實驗中通常采用的量。小等份應(yīng)不小于10μl;等份越小,儲液濃度因抗體蒸發(fā)及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。
抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4℃盡量不要超過1天。
3、抗體的運(yùn)輸:一般選擇4℃運(yùn)輸,避免了反復(fù)凍融對抗體活性的損害;如若選擇干冰運(yùn)輸,收到抗體是冰凍的,分裝時解凍,會增加一次凍融的過程,所以運(yùn)輸過程中盡量避免干冰運(yùn)輸。
短期保存
大部分抗體收到后4°C短暫保存1-2周,對抗體活性是沒有影響的。
如果要長期保存則最好是在-20°C,最關(guān)鍵的一點是要根據(jù)說明書推薦的方式來正確的保存抗體;
腹水形式的產(chǎn)品請在收到后立即凍起來,因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長期在4°C保存會導(dǎo)致抗體的降解。
稀釋到工作濃度的抗體,在4°C保存不得超過一天。
高濃度保存的蛋白質(zhì)更不易降解,理想濃度是1mg/mL或更高。因此,在-些抗體工藝中會加入一些穩(wěn)定劑(如BSA) 從而盡可能減少抗體結(jié)合到容器壁上造成的損失。但不能在偶聯(lián)抗體(如偶聯(lián)有熒光染料、酶或生物su)中加入穩(wěn)定劑,因為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑會與抗體競爭,降低偶聯(lián)效率。
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