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上海佰利萊生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第3年

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胞外多糖(EPS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

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胞外多糖(EPS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

本試劑盒僅供研究使用。

檢測(cè)范圍:

0.4mg/L - 50mg/L

使用目的:

本試劑盒用于測(cè)定微生物樣本中胞外多糖(EPS)含量

實(shí)驗(yàn)原理

胞外多糖(EPS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胞外多糖(EPS),再與HRP標(biāo)記的胞外多糖(EPS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物底物TMB顯色。TMB在HRP呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450計(jì)算樣品胞外多糖(EPS)標(biāo)準(zhǔn)品(80mg/L

0.5ml×1瓶









3

12孔×8條

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

6ml×1瓶

10

說(shuō)明書(shū)

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張




6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個(gè)




標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

40mg/L

5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

20mg/L

4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10mg/L

3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

5mg/L

2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.5mg/L

1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液


加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,混勻

2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50

6. 溫育:操作同3。

7. 洗滌:操作同5。

8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

9. 終止:每孔加終止

10. 測(cè)定:以空白孔調(diào)零,nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

操作程序總結(jié):

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計(jì)算

;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù)即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.會(huì)有結(jié)晶4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請(qǐng)避光保存。

7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

保存條件及有效期

;2-8<span font-size:10.5pt;"="">。

2.有效期:6個(gè)月


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