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當前位置:上海佰利萊生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 植物辣椒環(huán)斑病毒(ChiRSV)elisa試劑盒
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2023-09-11 17:15:30瀏覽次數(shù):256次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研試驗 |
品牌 | 佰利萊 | 可售賣地 | 全國 |
級別 | 優(yōu)級純GR | 含量 | 99% |
用途類別 | PCR試劑盒 |
產(chǎn)品名稱:植物辣椒環(huán)斑病毒(ChiRSV)elisa試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
注意事項:
1.基礎(chǔ)程序,擴增溫度和延伸溫度,反應(yīng)時間,循環(huán)次數(shù),PCR反應(yīng)液的配制,PCR技術(shù)的基本原理,PCR的反應(yīng)動力學,PCR擴增產(chǎn)物,PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
植物辣椒環(huán)斑病毒(ChiRSV)elisa試劑盒
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,植物辣椒環(huán)斑病毒(ChiRSV)elisa試劑盒PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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