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當(dāng)前位置:上海佰利萊生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 蠶白僵菌PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-07-19 09:32:04瀏覽次數(shù):303次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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主要用途 | 科研試驗(yàn) | 品牌 | 佰利萊 |
可售賣地 | 全國 | 級別 | 優(yōu)級純GR |
含量 | 99% | 用途類別 | PCR試劑盒 |
產(chǎn)品名稱:蠶白僵菌PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序,擴(kuò)增溫度和延伸溫度,反應(yīng)時(shí)間,循環(huán)次數(shù),PCR反應(yīng)液的配制,PCR技術(shù)的基本原理,PCR的反應(yīng)動力學(xué),PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,蠶白僵菌PCR檢測試劑盒PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
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